培养细胞电镜制备方法,我的体会:
1.如果是想看连接的细胞,原则上刮取比较好,这样细胞可以成团块。
2,需要观察其他细胞可以用酶消化。
3.细胞量收集要注意,不要太少,也不能太多,如果细胞太多,容易固定不好,脱水和包埋剂渗透都有问题。建议半个绿豆大小比较适合。
具体我的操作:
1.收集细胞悬液,低速离心4000转左右,弃上清液,加入0.5%戊二醛固定液混悬固定10分钟(这样的优点是,不要用较高的浓度的固定液去刺激细胞,混悬固定可以让细胞的各个面都可以固定到)。
2.高速离心10000转以上15分钟,弃上清液,缓缓加入3%的戊二醛固定即可。