lijie208239

最近我尝试着对胸腹水进行免疫组化染色 ,背景很深.我用的是北京的既用型试剂SP三步法.

shanghainese

怎么做的？

lijie208239

我用酒精固定30分钟后水洗，然后就用H2O2室温处理15分钟。血清封闭30分钟，后加一抗，4摄氏度过夜。以后就同常规了。。谢谢你的帮助。。

shanghainese

试一试用丙酮固定。
另外，胸腹水里的细胞都不新鲜了，容易产生背景。

lijie208239

谢谢你的帮助。我回想以下有可能是我在滴加一抗是用没有清洗的盖玻片盖在玻片上，我想这样可以防止抗体丢失，是涂片变干。没想到会有这种情况。还王老师能给一指示。我们科就我一个人做 。也没有个可以商量的。。谢谢了。

lijie208239

我还问一下，要是想对细胞涂片进行保存以后在做免疫组化，大概能保存多久？希望能帮助解决。 谢谢了

shanghainese

引用:

原帖由 lijie208239 于 2007-11-24 18:39 发表
谢谢你的帮助。我回想以下有可能是我在滴加一抗是用没有清洗的盖玻片盖在玻片上，我想这样可以防止抗体丢失，是涂片变干。没想到会有这种情况。还王老师能给一指示。我们科就我一个人做 。也没有个可以商量的。。 ...

你最好放在湿盒里来防止抗体丢。
背景高的原因不少。可以是抗体浓度过高，孵育时间过长，DAB 显色过长等等。

shanghainese

引用:

原帖由 lijie208239 于 2007-11-24 19:42 发表
我还问一下，要是想对细胞涂片进行保存以后在做免疫组化，大概能保存多久？希望能帮助解决。 谢谢了

保存在负八十度的冻箱里。

lijie208239

xie谢谢了   以后我会小心的

shanghainese

引用:

原帖由 lijie208239 于 2007-11-24 18:39 发表
谢谢你的帮助。我回想以下有可能是我在滴加一抗是用没有清洗的盖玻片盖在玻片上，我想这样可以防止抗体丢失，是涂片变干。没想到会有这种情况。还王老师能给一指示。我们科就我一个人做 。也没有个可以商量的。。 ...

没关系, 不用担忧.
以后有什么问题上这里来讨论.