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原帖由 dingwei 于 2009-10-10 09:19 发表 不难,十年前刚开始做冰冻时就是这样做的。后来经过反复实验,证明这个方法是错误的。难就难在你从没有做过好的片子,就分不清什么是好什么是差。执着地坚持错误,比什么都不懂的人更可怕。
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原帖由 dingwei 于 2009-10-22 09:32 发表 固定只是为了保持细胞形态,拿出来后和外面的空气温差过大,暴露在空气中时间太长都不会产生冰晶。内外温差大会产生细胞收缩,而不是冰晶;暴露在空气中时间太长,会引起细胞氧化、退变也不是冰晶。
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原帖由 dingwei 于 2009-9-12 07:52 发表 冰冻切片当然要固定。固定就是要保证组织的形态和成份,主要看核的结构,染色质要清晰可见。 只是你的操作本身就非常错误,所以感觉不出固定的效果。 冰冻切好片应该立即把切片放入甲醇、95%酒精或丙酮等固定液 ...
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