小小病理技术员

不知道大家有没有出现过以下问题，裂隙、伊红、苏木素染色不均匀。
我科用的国产脱水机，现在标本量一多，在包埋就能闻到二甲苯，我估计这些问题都是冬天透明、浸蜡不足产生的。
高人，指点一下把。

jensen0901

我们以前也遇到这样的问题，我们怀疑是脱水时第一缸酒精的浓度高，也可能是二甲苯过长，无水过长，第一缸蜡里有二甲苯，浸蜡温度过高等造成的，切片的时候感觉组织很脆，这时不要冻久了，切片速度不能过快。个人意见，欢迎指正。

小小病理技术员

现在我们已经把能改的问题都改了，一缸酒精一定是60%的，后面四缸就一个星期向前推进一缸后换一缸无水乙醇。
二甲苯时间也缩短了一刻钟
不知道今年冬天还会不会出现以上的问题，我感觉还是会的，我个人感觉是温度过低，国产脱水机不能恒温，造成的。

myzh

国产脱水机也可以恒温呀，你是什么牌子的脱水机？

hnzcr

这几个问题  ，我们这里也遇到过  ， 我感觉不是 温度过低的问题。  因为其它的组织脱水还是比较好的      组织冻太久会裂隙的

王华

个人意见：由图片大致推断组织脱水和染色过程存在几个问题。
1、脱水不足引起细胞组织收缩明显，组织发脆，切片时极其容易出现小裂纹。
很多人对脱水有一个误区：组织发脆发硬就是脱水过度，其实不然。
组织在酒精脱水时不足导致水分残留在组织里，二甲苯不能充分进入组织，在浸蜡过程中蜡也不能充分进入组织，蜡缸温度60度，对组织形成“干烤效应”，组织收缩变硬变脆。胃镜小组织用绵纸包着，非常影响脱水时液体交换，非常影响脱水效果。（丁伟老师有做过实验，也在会议上做过发言的！）
在病理科赶着脱水，赶着发报告的大环境下，组织脱水过头是不容易发生的，组织固定脱水不足才是经常发生的事！
脱水的酒精不建议使用无水乙醇大循环换液模式，推荐使用梯度浓度小循环换液模式：酒精缸分三组（①65%②75%）（③85%④95%）（⑤100%⑥100%）换液时组内第一缸倒掉，第二缸的试剂可以前移变第一缸，按组内的浓度梯度更新酒精。酒精不能跨组前移。
2、酒精缸的时间要够，包了绵纸的小组织就不能当小组织，当成大组织一样处理脱水就没有问题了。
3、蜡缸的蜡要定期及时更换，包埋时组织二甲苯味道太浓，不是浸蜡缸中的蜡太久没换就是浸蜡时间不够。

4、染色不均匀的问题要在两个方面找原因：（1）可能原因脱蜡不干净、二甲苯没脱干净导致染色不均匀。冬天气温冷，溶解速度缓慢，也有可能是试剂太久没换。（2）伊红上色不均，返蓝之后水洗时间太短，返蓝液残留，组织对伊红拒染。



个人观点，仅供参考！

[ 本帖最后由 王华 于 2013-9-15 21:12 编辑 ]

小小病理技术员

我们用的孝感 亚光脱水机

jhyjhy2013

支持王华老师的意见。以前我们科用的脱水机是樱花半封闭式的，冬天和夏天的脱水时间是不相同的的，冬天要相应的延长时间，脱蜡也在恒温箱中进行。

小小病理技术员

我想的也是这些问题，但是解决不了这些问题的。
染色的问题今年冬年我多注意下。

王华

我没有用过孝感亚光脱水机，所以这种脱水机的性能不是特别了解，有恒温功能吗？有混匀功能吗？用的是什么混匀模式？脱水机的性能对脱水效果有很大的影响。