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请给为高手帮忙解决软骨组织作免疫组化为什么脱片，谢谢！

cristal66

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1^# 大中小发表于 2008-2-1 22:43 只看该作者

请给为高手帮忙解决软骨组织作免疫组化为什么脱片，谢谢！

最近在做软骨组织的免疫组化，但是一直搞不懂为什么总是脱片，郁闷很久，也差了很多资料，还是解决不了。谢谢各位帮忙指导！急！

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liuyong

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2^# 大中小发表于 2008-2-12 13:44 只看该作者

请注意三方面的问题
玻片的处理
组织的处理
切片的厚度

江西省人民医院病理科刘勇

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cristal66

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3^# 大中小发表于 2008-2-15 01:53 只看该作者

谢谢！切片厚度4um，多聚甲醛固定48hr以上，玻片10%多聚赖氨酸涂片。10分钟枸橼酸缓冲液煮沸。但是还是有部分脱片。请指正！

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zhouweinjysd

新手上路

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4^# 大中小发表于 2008-2-15 10:15 只看该作者

我个人认为是脱水的原因。

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cristal66

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5^# 大中小发表于 2008-2-15 16:09 只看该作者

脱水？时间我们是2min-100%乙醇；1min-95-90-80-70%乙醇，难道短了？

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方与圆

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6^# 大中小发表于 2008-2-21 22:48 只看该作者

引用:

原帖由 liuyong 于 2008-2-12 13:44 发表
请注意三方面的问题
玻片的处理
组织的处理
切片的厚度

贵在坚持，难在坚持，成在坚持

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ChenRong

版主

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7^# 大中小发表于 2008-2-27 15:34 只看该作者

引用:

原帖由 cristal66 于 2008-2-15 01:53 发表
谢谢！切片厚度4um，多聚甲醛固定48hr以上，玻片10%多聚赖氨酸涂片。10分钟枸橼酸缓冲液煮沸。但是还是有部分脱片。请指正！

厚度3，固定好流水洗时间长点，试试吧！

为人民服务

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lijie208239

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8^# 大中小发表于 2008-3-2 21:16 只看该作者

我感觉流水冲洗直观重要。最好用中性的PBS在泡下。当然厚度也不可忽视。烤片温度及时间也要把握好。热修复更是得注意，因为软骨不想软组织。

当今,社会把人分成了魔鬼和乞丐,我选择乞丐。

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bagelo

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9^# 大中小发表于 2008-3-3 08:15 只看该作者

切片之后60度烤1小时，做组化之前60度再烤2～3小时，我还烤过过夜。如果还是脱片的话，把多赖的浓度加大些，我们用过sigma的多赖，而且用的是原液，还用过涂过两遍胶的片子，效果好了很多，因为组织要用高锰酸钾脱色素，再做组化很容易掉片，所以试了很多方法，你也可以试试。

认真做事，踏实做人！fighting!!

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