刘小玲

染色的原因大一些还是组织处理的原因大一些呀

dingwei

都有。没见你做真不好说。

刘小玲

我切片的时候，感觉组织好象没处理好似的。
切下的片子不是很透明很均匀很平整切的是4个看起来好象很厚似的。
染色：松节油（2缸）           各3分
         无水乙醇（2缸）        各2分
         95%酒精（2缸）        各1分
         85%酒精（1缸）         1分
           Harry苏木素              5分
          盐酸酒精                   数秒
           氨水                        数秒
         醇伊红                       数秒
75%、80%、95%、无水乙醇（3缸）各1分
松节油（2缸）各1.5分
管理员你好
要是蜡块处理的不好，比如脱水不好应该怎么办了？各种情况的处理方法应该怎样？
最后还想请教一下，影响染色新鲜度的最主要的是那些步骤，以后做片的时候可以注意一下了。

dingwei

把脱水过程说一下，染色时间不能用固定时间，要根据染液新旧，试剂新旧改变。蓝化尽量不要用氨水，温水或充分水洗，显微镜下观察染色深浅。还有松节油尽管能代替二甲苯，但效果没有二甲苯好。

刘小玲

丁老师你好
    我们医院的脱水过程是：中性福尔马林           4小时
                                     95%酒精（2缸）      各2小时
                                     100%酒精（2缸）    各2小时
                                     正丁醇（2缸）         各2小时
                                     石蜡（3缸）            各2小时（不好意思具体我记不清了大体应该是这样）
  我们医院处理出来的组织都普遍发黄一点。
丁老师你好我们医院一直都是用松节油（我感觉效果还可以）。我们听我们的老师说以前做过一次试验我们把我们用松节油做的片子和二甲苯做的片子混到一起。然后让一些专家去便认，他们没法分辨的出，哪些是松节油那些是二甲苯的最后我们医院通过检查就一直用松节油了，我们的老师都普遍不喜欢用二甲苯因为毒性太大，味道不好闻（所以连脱水都用的正丁醇）。

wjx

第一缸酒精浓度就用95%是否太高了？我们用70%-75%浓度。以后再逐级提升。二甲苯味道不好闻，正丁醇味道也不好闻。既然后面用松节油，为什么前面不用？

dingwei

楼上说的有道理。至于你们老师说以前做过一次试验我们把我们用松节油做的片子和二甲苯做的片子混到一起看没法分辨，可能是你们做的片子质量本来就不高。山东省的切片质量应该说这二年发展很快。但看你的脱水过程和染色过程，应该还不规范，松节油和正丁醇尽管都能透明，但没有二甲苯彻底，有时差异只是一点点，但总体质量会相差很大。二甲苯尽管有毒，但松节油也有，最重要的是做好排风设备，我想脱水过程中的二甲苯挥发并不多。

刘小玲

松节油的效果比正丁醇要好吗？
不好意思了我回去看了一下我们就是从就是从75%的酒精过的。

dingwei

都不是很好

刘小玲

丁老师你好上次的脱水方法我是凭记忆我今天看了一下程序是这样的：
10%中性福尔马林           4小时
75%酒精                       1
85%酒精                       1
95%酒精（2缸）           各1小时
正丁醇（4缸）               各1.5小时
石蜡（2缸）                   各2小时
石蜡（3缸）                 时间不定一般3小时左右
丁老师上次不好意思了。
我查了一下书正丁醇的脱水效果并不好，但是他对组织没有变脆，萎缩的损伤，比较柔和。
我今天就想把最后一缸的正丁醇改成100%酒精30分，把前三缸的正丁醇时间加长，这样会不会效果更好一些把正丁醇脱水不好的结果就弥补了。
丁老师我还有问题想问你，我们主任今天说了一些地方都是干封，有的都从100%酒精出来吹干再封，
丁老师我以前在济南上岗证培训学习的时候听过你的课，对我的提高很大，当时我就听你说电吹干封效果不好，我今天就做了一下比较，拿起片子看没透明的组织比较干立体，而透明的片子比较融合，镜下比较折光度不行，细胞膜核膜边界不是很清。但是我感觉好想不经过透明的片子染色比较艳一些。哈哈，这只是我的看法了。还请丁老师解说更详细的了。