Sayeed’s 幽门螺杆菌染色法
Sayeed’s 幽门螺杆菌染色法
0.5%过碘酸水溶液:过碘酸0.5g,溶于100ml蒸馏水中。
Schiff’s试剂配制:
(1)将200ml蒸馏水煮沸,停火后加入碱性品红1g,搅拌至染料完全溶解。
(2)待溶液冷至50℃加偏重亚硫酸钠1g摇荡溶解后冷至室温(25℃)。
(3)再加N-HCI液(N-HCI液:8.15ml浓盐酸加蒸馏水至100ml)20ml充分摇荡。
(4)在室温暗处避光保存18-24h,溶液呈草黄色。
(5)加新鲜活性炭2g充分摇荡数分钟。
(6)用滤纸过滤,过滤液应无色或淡黄色然后盛入棕色小口瓶中置冰箱(4℃)贮存,贮存液可保存一个月,如变为淡红色即为失效。
Mayer苏木精液:
苏木精1g
硫酸铝钾50g
碘酸钠0.2g
蒸馏水1000ml
水合氯醛50g
枸橼酸1g
将苏木精,硫酸铝钾及碘酸钠依次加入蒸馏水中,略加热搅拌,待全溶解后过夜。再加入水合氯醛及枸橼酸并加热至煮沸5min ,冷后过滤备用。染色时间5-10min。
美蓝贮存液:
美蓝(亚甲蓝)1.4g
95%乙醇100ml
美蓝工作液:
美蓝贮存液10ml
自来水90ml
Sayeed’s 幽门螺杆菌染色法染色方法步骤
1 切片脱蜡至纯乙醇。
2 蒸馏水漂洗。
3 0.5%过碘酸水溶液1min。
4 自来水充分水洗。
5 蒸馏水洗。
6 Schiff’s试剂1min。
7 自来水洗2min。
8 蒸馏水洗
9 Mayer’s苏木精染液染2min。
10 自来水充分水洗。
11 美蓝工作液1min。
12 蒸馏水洗。
13 脱水,透明,中性树胶封固。
结果:粘蛋白粉红色;幽门螺杆菌蓝色。