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回答KETTY的问题

回答KETTY的问题

引用:
下面引用由ketty2004/04/08 10:54pm 发表的内容:
能介绍一下琼脂包埋?
KETTY:对不起啦,才发现你提出的问题,下面就您的提问做一公开回答也好让大家共同探讨与切磋。
                   微小组织琼脂——石蜡双重包埋法
试剂:
琼脂     2—3g
蒸馏水   100ml
混合后加热煮沸15分钟,使琼脂充份溶解,并需不断搅拌以免底部焦化。然后趁热滤过并分装于青霉素小瓶中,置冰箱保存备用,用前将小瓶置水浴中加热,使琼脂溶化。
操作步骤:
1用摄子将小组织置一洁净玻璃板上,按号排好,避免错号,若组织过小,肉眼观察有困难,可向组织上滴一滴伊红或是苏木素、亚甲兰染色数钞钟,用滤纸吸去组织周围过多的水份。(滴染后蒸馏水水洗)(相信各位都练出了火眼金睛,所以此步可省略)
2缓慢滴加已溶化的琼脂,先从周围滴加,以免漂浮分散,然后向组织上滴加,由于温度降低,琼脂逐渐凝固,待加至一定厚度(约2—3mm)为止。
3用手术刀片修成方形小块。
4脱水、透明、浸蜡;琼脂块经80%、90%、100%各级乙醇脱水,每级乙醇至少2小时。二甲苯透明30—40分钟,以琼脂完全透明为度(琼脂在二甲苯中漂浮,应注意防止串号)。于95%乙醇过夜亦无妨。也可随同外科标本一起处理。
操作注意事项:
1脱水需充份彻底。
2包埋石蜡温度不能过高(62度以下)
3切片时下刀需缓慢,避免挤压皱缩。
4展片水温应稍低于石蜡溶点,否则切片易碎、离散或连不成带状。

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回答KETTY的问题

有一个小儿科的问题:琼脂在石蜡中侵泡时,蜡的温度一旦过高,琼脂会溶解吗?我觉的包埋的时候要求还不是特别高?

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回答KETTY的问题

不会的,
当然石蜡的温度不能超过100度的。
琼脂的溶点是100度以上要在开水中浴温溶化的。

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