陈旭红

各位老师
  我要做新鲜冰冻切片，脑组织新鲜取出后用液氮冷冻，放入－20度冰冻切片机中待温度平衡后开始切，但不论怎样调整刀与组织的角度，都要碎片子，这是怎么回事？

frankbj

可能是温度太低。

刘正国

您用液氮冷冻多长时间？

chenrong

我基本同意lyj老师的意见.
我还想说一下,那就是:哪怕温度恒温在-20或是-18度.放的时间长了,也一样会脆的.得马上切. :em17:  :em17:

刘正国

[这个贴子最后由刘正国在 2003/04/01 11:33pm 编辑]

我认为，因脑组织间质和水分丰富容易发生切片碎裂，而且冰晶现象很严重，此问题不是太好解决。我也切过脑组织，用液氮冷冻30秒以上切片碎裂严重，不用液氮冷冻冰晶又很严重，-18....-25都一样，用液氮冷冻可以避免冰晶产生，只有在用液氮冷冻的时间长短上做文章。

dingwei

[这个贴子最后由dingwei在 2003/04/10 01:38pm 编辑]

有一篇有关脑组织如何做冰冻的文章我见过，好象是北京军区总院写的，是先用高渗的糖进行微波处理，把组织内的水份吸出一点，再冷冻，的确有效果，冰晶比任何一个冷冻的方法都要好，致于冷冻室温室我觉得-13度就可以了。

小羽

我也做过脑组织的冰冻切片，用的是多聚甲醛灌流固定24小时，放入30％的蔗糖PBS液致脑组织沉底，防冰晶底效果较好。不过想问一声，你底切片厚度为多少。切片时会有褶吗。

changfeng818

可以用手摸一下，另外用生理盐水进行微波处理好象也有防冰晶底效果。

天竹石

高渗糖与生理盐水怎么样微波处理啊？？？

witty

SP法为什么要加血清,用意何在?