a0038161

各位老师请教一个问题：
我在作免疫组化，标本是hela细胞。用的是ABC法，抗体浓度到了1：50，染色还是淡----公司的人说的。
可能哪里出了问题呢？

shanghainese

有很多原因，如固定，洗涤，抗体浓度，孵育时间和温度，显色时间，试剂质量等等。
所以很难判断您的问题所在。

folksmile

看了阳性和阴性对照没？

folksmile

写的时候还是沙发，传上去就是二楼啦；呵呵，下次吧

[ 本帖最后由 folksmile 于 2007-1-11 11:57 编辑 ]

a0038161

hela就是阳性对照，biolegend公司把它当作质控。本来想染石蜡切片的，结果石蜡切片染不出，hela又很浅。
我使用-20度甲醇固定，所有孵育步骤均是37度孵箱，采用PBST洗涤，均是3次，每次5分钟。
对照用血清30分，一抗60分，二抗30分，ABC30分，DAB2--6分，对比染色5--10秒
请问，其中有哪些条件可以在改一下？
谢谢诸位老师！

shanghainese

引用:

原帖由 a0038161 于 2007-1-11 12:42 发表
hela就是阳性对照，biolegend公司把它当作质控。本来想染石蜡切片的，结果石蜡切片染不出，hela又很浅。
我使用-20度甲醇固定，所有孵育步骤均是37度孵箱，采用PBST洗涤，均是3次，每次5分钟。
对照用血清30分， ...

什么抗体？哪个克隆？

a0038161

MICA/B  6D4 单克隆抗体 公司说可以做ihc

folksmile

引用:

原帖由 a0038161 于 2007-1-11 13:34 发表
MICA/B  6D4 单克隆抗体 公司说可以做ihc

公司说可以吗？

[ 本帖最后由 folksmile 于 2007-1-11 18:53 编辑 ]

shanghainese

只有找biolegend公司帮忙了。

a0038161

多谢帮忙了。