襄风

KI67细胞染色异位原因是一抗的试剂出了问题,这样的问题我碰到过,一家的试剂出现了细胞浆着色,换了一家试剂就解决了,一定要选择好的一抗.

rachelsun

请问您最后用了哪家抗体做出来了，您使用热修复吗？

襄风

上海长岛

襄风

用EDTA

shanghainese

引用:

原帖由 襄风 于 2013-7-21 08:58 发表
上海长岛

哪个克隆？

深山老林

我们用的Ki-67，没出现过此类现象啊！

ChenRong

你二抗用的哪家？长岛的二抗绝对不能用，会出事的，我们也是刚了解了这个情况，前面一直用，后来总发现很多抗体做的效果很不好，恨得都是定位不准，或是阴不阴阳不阳的，特别是在HER-2上证明了，换了一家公司的二抗后明显是膜阳性，很漂亮，原先长岛的二抗就是浆阳性，广泛的。大家注意下，其他的一抗还可以，在慢慢摸索吧。

ChenRong

丁老能不能做个表，把各个公司的试剂好坏客观的列下，让大家少走弯路

shanghainese

引用:

原帖由 ChenRong 于 2014-1-2 11:41 发表
你二抗用的哪家？长岛的二抗绝对不能用，会出事的，我们也是刚了解了这个情况，前面一直用，后来总发现很多抗体做的效果很不好，恨得都是定位不准，或是阴不阴阳不阳的，特别是在HER-2上证明了，换了一家公司的二抗后 ...

你大概是没有设isotype control 吧？不然早就发现问题了！

ChenRong

引用:

原帖由 shanghainese 于 2014-1-2 12:26 发表

你大概是没有设isotype control 吧？不然早就发现问题了！

关键在于科室成本的问题，试剂公司选择的余地不大，要经过卫生局三产备案备注，拿什么3证，非常繁琐，况且原先主任也没同意换公司，我在自身找原因，可效果一直不理想，现在换主任了，利索的换公司，主要把二抗换了，先是试用，一用就知道长岛二抗问题很大，我对于做免疫组化也是信心满满，很多事情不是自己所能左右的，有时会比较无奈。遇到好用的试剂和不好的或是没底的试剂，工作心情完全两样