古听＋叶子

免疫组化哪一步对抗原影响最大?

shanghainese

引用:

下面引用由古听＋叶子在 2005/10/28 10:34pm 发表的内容：
免疫组化哪一步对抗原影响最大?

能否把您的问题说详细些？

古听＋叶子

是这样的:前面一段时间科里的免疫组化总是做的不大理想,有些应该出来的没有出来,结果就是反复做,报告拖了很久.大家都找了很多原因,就是找不出来.后来我们换了中性福尔马林稍微好点了.LCA一般都能出来,L26,CD3,CD79就比较难了.

shanghainese

不知您用的是那些克隆？
实验时设立了阳性，阴性对照没有？
做不出来的原因有很多。
组织不好，固定不够或固定过头。浸蜡包埋时蜡温过高或时间过长。切片后处理不当。
抗原修复不好，或不该修复的修复了。
一抗失效或浓度太低。一抗孵育不好温度太高或太低。一抗被污染了。
二抗不好。
Streptavidin-HRP 不好。
DAB 失效。
等等。

闲云

你那可能前期处理哪一步温度过高抗原破坏了，如果这个没问题，修复时间加长点，一抗4度过夜，再看看，再不行那你整个系统全换过重来了！！

雪蕾

引用:

下面引用由古听＋叶子在 2005/10/28 11:36pm 发表的内容：
是这样的:前面一段时间科里的免疫组化总是做的不大理想,有些应该出来的没有出来,结果就是反复做,报告拖了很久.大家都找了很多原因,就是找不出来.后来我们换了中性福尔马林稍微好点了.LCA一般都能出来,L26,CD3,CD ...

浸蜡的温度会不会太高，时间会不会太长？

古听＋叶子

请问有没有“修复过度”这种说法？

hnzcr

引用:

下面引用由古听＋叶子在 2005/11/14 08:44pm 发表的内容：
请问有没有“修复过度”这种说法？

应该有的