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复染怎么总出问题?请教大家了

小飞

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1^# 大中小发表于 2005-1-28 21:47 只看该作者

复染怎么总出问题?请教大家了

我免疫组化做好后可以看见阳性黄色但复染加苏木素半小时了细胞核都没染上,而整张片子都变成红色的了什么也看不见了,自来水冲洗要多长时间?是仅仅冲掉苏木素就可以了还是要泡半小时? 怎么细胞核都染不上呢? 谢谢大家!

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fangdang

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2^# 大中小发表于 2005-1-28 22:00 只看该作者

复染怎么总出问题?请教大家了

复染的苏木素最好是herry,s苏木素，衬染的时间很短，只要2－5min即可，返蓝时可用pbs冲洗可加速返蓝时间。

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小飞

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3^# 大中小发表于 2005-1-28 22:15 只看该作者

复染怎么总出问题?请教大家了

我用苏木素染了半小时细胞核也没出来这是怎么回事?
用PBS?说明书上说是用自来水冲洗掉啊 ?

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liuhuaqin

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4^# 大中小发表于 2005-1-29 09:45 只看该作者

复染怎么总出问题?请教大家了

有些组织抗原修复过度，对比染色时不易着色。

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fangdang

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5^# 大中小发表于 2005-1-29 23:52 只看该作者

复染怎么总出问题?请教大家了

建议你用一张不作免疫组化的石蜡切片做一次he染色看看苏木素是否正常。

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小飞

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6^# 大中小发表于 2005-1-30 15:54 只看该作者

复染怎么总出问题?请教大家了

哦谢谢各位我再试试看

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小飞

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7^# 大中小发表于 2005-2-1 10:35 只看该作者

复染怎么总出问题?请教大家了

我苏木素做了张HE是好的没问题是不是抗原修复时候我用EDTA微波煮沸20分钟有影响? 可不可以修复时缩短时间煮沸就拿出来呢?
谢谢

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fangdang

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8^# 大中小发表于 2005-2-1 16:04 只看该作者

复染怎么总出问题?请教大家了

是不是抗原修复时候我用EDTA微波煮沸20分钟有影响?我认为没有很大的影响，因为组织片在碱性环境的抗原修复后，PH值会有所变化，但是之后的pbs缓冲液冲洗后组织片应该为中性环境。

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liuhuaqin

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9^# 大中小发表于 2005-2-1 17:48 只看该作者

复染怎么总出问题?请教大家了

免疫组化对比染色核不易着色，多见于修复过度，尤其是压力锅修复较长的标本。我建议你用微波中火连续10分钟即可。

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小飞

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10^# 大中小发表于 2005-2-1 20:26 只看该作者

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我想可能是微波抗原修复时间过长对细胞核与影响破坏吧是否应该缩短时间
有人说著沸就拿出来冷却20分钟即可这样可以吗

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