淡若水

在病理制片中用TO代替二甲苯的的体会            在病理制片中用TO代替二甲苯的的体会    因为现在的单位在病理制片中，一直用TO代替二甲苯制片，所以我也只有继续接着用TO。最初抱着怀疑的态度来看待这种试剂。经过大半年的使用和观察，发觉TO确实优点不少，特此介绍一下我的体会。    在脱水透明浸蜡这一步里，经酒精梯度脱水，用TO透明，然后浸蜡。在切片时感觉和二甲苯做透明剂没有区别，组织没有发硬变脆的感觉。我们的蜡块，提供给上级医院做免疫组化，病人返回过一例淋巴瘤的免疫组化片子，片子非常漂亮，既薄也没有刀痕。如果我们的蜡块不好，上级医院也切不出这样的片子的。     在第一次用TO做为脱蜡剂染切片时，看见经过最后一步80%的酒精，水洗后玻片上有略浑浊的水滴时，好像和二甲苯时这一步的透明不同，我担心染色效果不佳，但是片子出来后，染色效果完全没有影响。解决上述问题，其实也简单，就是注意及时更换TO后的各步酒精，保持酒精应该有的浓度，彻底洗去TO，水洗时玻片便可以变得清澈透明。     封片前，TO也可以在无水酒精后使用，我们用的3缸，每缸2-3分钟即可。采取湿封法，片子没有干封那样的微小气泡。虽然也有气味，但是气味较小，是松节油的那种气味。     二甲苯是苯类试剂，是有毒的，解决办法要么就是采取隔离操作，要么就是加强通风换气。     TO试剂瓶签上介绍无毒。不知道有没有可靠的资料，证明它也是有毒的？如果确实没有毒，或者毒性小于二甲苯，我觉得还是值得用TO代替二甲苯的。

xiaoniou777

价格怎样？多少钱一瓶？

淡若水

我没有经手买过，问科室主任，说大概比二甲苯贵一半。但是从我使用中观察，似乎消耗比二甲苯要小些，因此实际上费用比二甲苯贵不了多少。
从瓶签的说明来看，这种试剂主要成分是松节油。虽然说明书介绍可以溶解封固剂，但是我觉得真的用TO稀释变浓稠的封固剂，效果并不好。但这并不影响封片时，即使载玻片上残留有TO，用二甲苯稀释的封固剂加盖片时仍然切片透明。

淡若水

下面是用TO代替二甲苯制作的蜡块切片染的免疫组化：


[ 本帖最后由 淡若水 于 2010-12-18 19:53 编辑 ]

ganqhhz

我们科在组织脱水透明那里还是用二甲苯的，后面切片脱蜡透明及稀释树胶都用TO的。效果一直都好。

淡若水

冬天，气温低，我觉得脱蜡时，载玻片边缘的蜡滴因为要厚点，脱蜡时不易脱净。但是切片中有组织的部位因为蜡熔掉流走了，蜡不多，还是能脱干净，因此对染色效果没有影响。只是片子边缘这些少量残留的蜡，要用手指甲将它刮掉。
不知道其他厂家的同类产品有没有这样的现象？

wangx

宝贵经验，学习了，谢谢！

dingwei

这样的免疫组化不能说明问题，只有少数正常T淋巴细胞着色，这种正常T细胞的抗原本身就很强，就是再稀释100倍也能很好地着色。而关键要看肿瘤细胞的着色或定位，比如这一例，可能是B细胞淋巴瘤，那应该传CD20、CD79a上来看看；如果是T细胞淋巴瘤，说明这个染色是失败的，因为肿瘤细胞都没有着色。像KI-67，也只是少数细胞着色，好与不好往往只是阳性细胞数量不同，并不是着色正确就是对的，就是好的，这就是我们技术员要学会鉴别的。

huage5401

学习。。。

淡若水

不知道为什么不能传图，只有将本例其余免疫组化的图片传到华夏病理的技术交流区同样的标题下了。一并请丁伟老师评讲。
谢谢！