lihua328

我做的脑切片厚度为30微米，我也曾尝试着做玻片法，但是总是掉片：（
我的玻片是用了多聚赖氨酸处理的啊？？？

moon19912002

30微米做玻片法,肯定要掉片的。我做8微米还掉，5微米就不掉了。切片厚是脱片的一个重要原因。　

lihua328

谢谢啦，我就说嘛：）
所以只能选择漂片啦！
那如果大鼠脑只切5－8微米的话，是不是就不好观察结构呢？？

moon19912002

不会的，太厚才不容易观察结构。

fangdang

我的玻片是用了多聚赖氨酸处理的啊？？？ 用了不如不用好。不是我咒你，就是5－8微米的话，还会有一大批会掉片。

lihua328

是吗！
那大家为何不都来做漂片法，都不要担心掉片问题啦：）

lihua328

引用:

下面引用由moon19912002在 2004/04/04 07:55pm 发表的内容：
不会的，太厚才不容易观察结构。

可我导师非得让我切这么厚，是什么原因阿？？
是不是好看突起些啊？

fangdang

冰冻切片怎么漂片？？？

lihua328

我就是用冰冻切片漂的呀？
您看看我的步骤是不是不对呀？（怕～～～～～～～～～～）
1、脑组织4％多聚甲醛灌注固定后，取材再固定2－24h
（由于疏忽，有的组织再固定到了48h－60h，不知这对免疫组化影响是不是很大？）
2、蔗糖脱水后——OCT包埋至－70度冰箱保存
3、恒温冷冻切片机切片，用载玻片收集，——至－70度冰箱保存
4、做组化时取出，然后浸入PBS，组织片便脱下来了——然后就可以漂片啦

fangdang  老师：你看这样是不是不妥当啊？需要怎么改进啊？
急盼赐教！！谢谢！！

fangdang

因为脑组织含脂质较多不易与多聚赖氨酸结合。