lihua328

请教：我做脑组织冠状切片，厚30微米
我切后就放到冰箱冻着，准备直接免疫组化，可以吗？急！！！！
谢谢！！！！！！！！

lihua328

忘了说了，我取材是用4%的多聚甲醛灌注固定：)

shanghainese

引用:

下面引用由lihua328在 2004/03/05 11:23am 发表的内容：
请教：我做脑组织冠状切片，厚30微米
我切后就放到冰箱冻着，准备直接免疫组化，可以吗？急！！！！
谢谢！！！！！！！！

只要切片没有冰结晶，当然可以用。
您的组织冰冻之前已经固定了，切片后不必再固定了。

lihua328

谢谢你啦，看来是我自己弄错了别人的意思,呵呵
再问一下抗体稀释一般就是用PBS吧？还有每张玻片大约需要滴多少毫升已稀释的抗体（比如我做的大鼠脑组织冠状切片），谢谢啦！！！

可乐猫

楼上那位，做冰冻切片之前就用醛固定那你还能冻上吗？用什么冷冻方式呢？
我记得过去用半导体冷冻才可以冻前固定。不过那已过时了，现在都现代化了。

lihua328

引用:

下面引用由可乐猫在 2004/03/07 00:41am 发表的内容：
楼上那位，做冰冻切片之前就用醛固定那你还能冻上吗？用什么冷冻方式呢？
我记得过去用半导体冷冻才可以冻前固定。不过那已过时了，现在都现代化了。

????
不明白你的意思 :em15:

可乐猫

你的贴子的主题是《冰冻切片都要固定吗？》
难道你问的是石蜡切片？石蜡切片是标本最先固定的。
冰冻切片可是新鲜标本切片后固定。
免疫组化也一样，
但是免疫荧光可千万别固定。

lihua328

引用:

下面引用由可乐猫在 2004/03/07 12:40pm 发表的内容：
你的贴子的主题是《冰冻切片都要固定吗？》
难道你问的是石蜡切片？石蜡切片是标本最先固定的。
冰冻切片可是新鲜标本切片后固定。
免疫组化也一样，
...

我是先用多聚甲醛固定再用蔗糖脱水，然后再实行冰冻切片啊
我的意思是是不是切完片后还要用比如丙酮等固定：）

fangdang

PBS稀释一抗是可以的,但不能长时间保存.还有每张玻片大约需要滴多少毫升已稀释的抗体?看组织大小而定,一般我是50ul

可乐猫

引用:

下面引用由lihua328在 2004/03/07 10:40pm 发表的内容：
我是先用多聚甲醛固定再用蔗糖脱水，然后再实行冰冻切片啊
我的意思是是不是切完片后还要用比如丙酮等固定：）

不用再固定啦。