michelle

各位老师，现在我想做数据统计，拿出两个月之前做的组织铺片免疫组化片子，发现片子掉色掉得很厉害，而且还有组织模糊现象。
我是用DAB显色，中性树胶封片。
不知道到底问题出在什么地方，请给予指导！谢谢！  :em02:

fangdang

1.组织片,最后脱水可能不彻底.2.中性树胶被搀杂其他有机溶剂.BDA褪色经时间迁移而进行,2个月也忒短时间了.

shanghainese

另外可能的原因：1 组织没有固定好。2。核套染太浅和水洗不充分。3。封片不好，有气泡。
DAB反应后为棕色物质不溶于水，酒精和二甲苯。

孟奎

组织铺片的免疫组织化学染色同冷冻切片的免疫染色方法，但不能使用过氧化氢，会导致组织结构破坏，模糊的结果考虑是阳性定位不准，正常不应该出现这些问题的

maxueqiang

我也有碰到这样问题，据说染色后置4度冰箱可保持不褪色。

yjd

DAB显色的免疫组化切片是不会出现掉色的现象，组织切片出现模糊现象可能是固定不充分，特别是冰冻切片。

临风揽月

[这个贴子最后由临风揽月在 2004/02/16 04:18pm 编辑]

应该是固定不良引起的！不知你们用什么作固定液？

yjd

对于固定液的选择我认为：常规切片最好用10%中性（为了以后做免疫组化）福尔马林，如是冰冻切片最好用冷丙酮，如是为了分子病理服务应用4%的多聚甲醛（AFP），如是为了科研应视不同组织的要求进行单独固定，这可能要不同的单位需要不同的要求。