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[求助]免疫荧光双标问题

[求助]免疫荧光双标问题

请教:免疫荧光双标中“间接法-同种动物抗体法”(分布固定法)目前是否一般不用?有谁做过?第一次染色后如何处理切片更简便、合理?谢谢!

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我科现采用,
免疫小鼠的胃等器官制成抗原片,在4度冰箱中保存,

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谢谢回复!
  我指的是两步间避免交叉反应常用的处理方法,书上讲用甲醛蒸气处理切片,但不知具体如何处理?另外,用免疫组化双标试剂盒中的双标阻断液处理是否合理?我最近这样处理后两种荧光均观察不理想。曾有同学用一抗同种动物血清做双标荧光两步中间不做处理的,我认为这样会出现交叉反应不合理,但不知如何处理更简便、合理?所以向大家请教!因面临着毕业,3个一抗均为小鼠单克隆抗体,不可能再重新订了,心急如焚,渴望高手能帮忙!另外,一抗为IgM,荧光标记的二抗是否必为IgM?因订国外的抗体已来不及了,不知国内哪个公司有荧光标记的IgM二抗?。

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