求教各位老师及前辈

chunyan111

新手上路

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1^# 大中小发表于 2003-10-20 13:50 只看该作者

求教各位老师及前辈

我作小鼠卵巢的免疫组化，结果应该是卵母细胞着色，可我做的结果是颗粒细胞广泛着色，卵母细胞着色则相对较浅，我用中山的S-P试剂盒。
抗原修复：高温高压 2分钟，自然冷却
一抗:常温1小时，4度冰箱过夜，常温半小时
二抗：37度 15～20分钟
三抗：37度 15～20分钟
DAB：3mg 加PBS 3ml 3％H2O2 一滴
请问有什么可以改进？
急盼！！！！

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临风揽月

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2^# 大中小发表于 2003-10-21 15:07 只看该作者

求教各位老师及前辈

可能是背景染色比较强吧，抗原修复后急速冷却，二抗三抗室温30分钟。还有就是双氧水的量是否过了？因为不知道的的一滴是多大！

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chunyan111

新手上路

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3^# 大中小发表于 2003-10-22 12:07 只看该作者

求教各位老师及前辈

多谢指教，我再试试看！

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chunyan111

新手上路

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4^# 大中小发表于 2003-10-24 12:12 只看该作者

求教各位老师及前辈

我试着照您的办法又做了一次，结果不错，没有非特异性染色，但特异性染色仍不够强，还有别的高招吗？

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临风揽月

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5^# 大中小发表于 2003-10-24 13:27 只看该作者

求教各位老师及前辈

可以提高一抗的浓度试试！抗体修复液用的是什么？

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