linda

我是个学生，现在研究基底前脑胆碱能神经元中甘丙肽和乙酰胆碱共存的问题，请问我应该买哪些试剂呢？买了抗甘丙肽和抗CHAT，还要定两个二抗和两个ABC试剂盒吗？ABC试剂盒包括二抗和DAB染色吗？是两个免于组化分别做吗？还是做双标？希望各位能告诉我，将不胜感激！ :em16:

zure

我试着回答一下。如果你只买了抗甘丙肽和抗ChAT，也就是说只买了一抗，那还需要买二抗（即抗一抗的抗体），二抗试剂盒一般都包括DAB染色等一套试剂。比如说你买的一抗都是小鼠（mouse)的，那二抗就只需要买一个抗小鼠的二抗（一般用山羊或兔制备），不需要买两个了。
如果你研究的是共存的问题，我感觉是做双标好一点，但具体怎么做我也不清楚，只能另请高人了，其实我也很想知道双标怎么做，因为我做的实验也涉及到同时做两个成分的免疫组化切片。

4℃

有些公司ABC试剂盒包括二抗和DAB，你最好先选好公司咨询。
做双标只需要用2个有对比的显色系统就可以了，一般一个为核抗原一个浆表达做出来效果比较好。