dingwei

[这个贴子最后由dingwei在 2003/10/20 09:40pm 编辑]

        基底膜 、 中性粘液、   糖原  (P.A.S.)法
碱性品红 1 g 活性炭 2 g
当量盐酸 20 ml 偏重亚硫酸钠 1.5 g
Schiff试剂配制:
1. 碱性品红1g，放入200毫升蒸馏水中，煮沸，搅拌，充分溶解。
2. 冷却至50℃时过滤，滤液中加入当量盐酸20毫升。
3. 加偏重亚硫酸钠 1.5 g，置于暗处过夜。
4. 加活性2 g，摇晃，过滤，以无色为最佳。棕色瓶，4℃冰箱保
   存。
染色步骤:
1. 切片脱蜡至蒸馏水。
2. 1%过碘酸水溶液5～10分钟。
3. 蒸馏水洗多次。
4. Schiff液10～15分钟。
5. 流水冲洗10分钟。
6. 苏木素复染。（1～2分钟）
7. 酒精脱水，二甲苯透明，树胶封固。
结果：基底膜 、中性粘液、糖原红色。
注意：1.做糖原染色阴性对照片用淀粉酶消化处理。
      2.糖原染色容易水解，取材标本最好新鲜，不要经过水洗，最好用苦味酸酒精固定。
      3.固定液用中性福尔马林为佳。
      4.如Schiff液发红, 再加入少量偏重亚硫酸钠,使液体颜
      色变清后又可使用.

楷

请教丁老师:1%的高碘酸水溶液配法:高碘酸1克,双蒸水99毫升.是否正确.
     1%的高碘酸酒精2溶液:高碘酸0.4克,1/5克分子醋酸钠 5毫升, 95%酒精 35毫升,
     双蒸水10毫升.是否正确.
       PAS染色用高碘酸的水溶液好还是酒精溶液好呢?

dingwei

没试过，你可以把二种方法对比一下。1%的高碘酸水溶液配法应该没错。

戴妮丝

丁老师：苏木素复染得目的试什么呢？如果单是多糖是否可以不用苏木素复染！

〖非我莫属〗

苏木素在这里是衬染的作用,让细胞核些许着色,这样使PAS阳性结果更容易判断!

楷

丁老师：我在染片时Schiff液暴露在空气中十分钟后就变红，是否有问题？染出的片特红。染液该如何改进？

bing564

此图很漂亮啊，不愧为浙一技术一把手

dingwei

引用:

下面引用由楷在 2003/09/26 11:02am 发表的内容：
丁老师：我在染片时Schiff液暴露在空气中十分钟后就变红，是否有问题？染出的片特红。染液该如何改进？

可以是偏重亚硫酸钠不纯了，可多加一点试一下。

楷

丁老师：我往100ML SCHIFF  液中加入1克偏重亚硫酸钠，结果还是一样，染片过程中大约十分钟后染液就变红。

dingwei

你的偏重亚硫酸钠可能已经失效了。买新的了。