coldant

同题目。
我想用冰冻切片可以省去很多麻烦，比如抗原修复。但不知液氮保存的标本能用来做冰冻切片吗？怎样处理？
谢谢。

shanghainese

Hi couldant,
First, you have to know your antibody works on frozen or paraffin section, and then you can make decision to stain on what kind tissue section.
Let me find my Fast red and Methyl Green counter staining IHC slides, I will send these images to you.

dingwei

如果讲表达，冰冻好，有很多抗体只能做冰冻，不能做石蜡；讲定位，石蜡好。

zhtp2003

冰冻切片的优点是：能很好得很保持抗原活性（尤其是表面抗原）和酶。而且冰冻切片简便快速，省去固定、包埋、和切片后处理等一系列繁琐步骤。缺点：一般片子没有石蜡的清晰，最主要得是它不能用于回顾性研究，比如，你做临床取材就不太好办，标本来源是个问题！

coldant

谢谢大家，thank you, shanghainess.
我要作的c-kit蛋白，属于膜蛋白，标本是结肠。必须微波炉抗原修复。试了几次都不理想，只有1次有一张切片黏膜层出来了，但肌层脱片厉害，未观察到。我体会微波炉抗原修复很容易脱片。染了几张冰冻切片，全部都染出来了，但那次切片不好，只切了黏膜和黏膜下，每看到我想要的肌间神经丛。我觉得冰冻切片在200倍以下结构还是好的，但高倍下要差一些。
另外，有人说液氮保存的标本组织结构不好，应该先用OCT包埋再冷冻。我的标本都是直接冷冻的，不知冰冻切片如何？

shanghainese

各 位 朋 友：你 们 好！
我 是 一 位 过 路 客， 偶 然 的 机 会 进 入 了 贵 网 站 和 论 坛。 看 到 这 里 热 火 朝 天 ， 忍 不 住 插 几 句 嘴，请 各 位 原 谅。
多 年 前，我 也 和 各 位 一 样 认 为 单 克 隆 抗 体 不 适 合 用 于 石 蜡 切 片。现 在 看 来 这 个 观 点 不 太 正 确。关 于 这 个 话 题，以 后 找 机 会再谈。
不 过， 各 位 在 工 作 中 确 实 遇 到 这 个 问 题。 我 的 见 解 是：
1. 如 果 抗 体 是 自 己 做 的，只 能 试 各 种 方 法 包 括 不 同 的 RETRIEVAL。
2. 如 果 抗 体 是 买 来 的 ， 请 问 明 免 疫 组 化 的 情 况。不 少 公 司 虽 然  卖 的 是 同 样 克 隆 的 抗 体 ，但 是 各 自 实 力 规 模 不 同，有 些 有 免 疫 组 化 资 料 ，有 些 没 有。各 位 也 可 上 MEDLINE 查 找 有 关 的 文 章。
另 外， 冰 冻 切 片 的 质 量，只 要 固 定 的 好，不 比 石 蜡 差。
我 们 是 用 OTC 包 埋，液 氮 冷 冻，储 藏 在 负 八 十 度 低 温。