zhtp2003

丁老师：
    谢谢你！还有问题请教：我作小肠的免疫组化，为了区分上皮层和固有层的淋巴细胞，我要把基底膜染出来，因此我想最好用双重染色，基底膜的成分住要是层粘连蛋白。我用其抗体把两层区分开来再用抗CD3（或CD4或CD8或TCR) 抗体来标记淋巴细胞现在就出现了淋巴细胞被染两层的现象！不知这作何解释，是否还有更好得方法？                          谢谢！

dingwei

层粘连蛋白不容易做好，最好是用酶消化，CD3最好是热修复，二种抗体修复条件不一样，要想做好不太好办。

zhtp2003

丁老师：
    谢谢！我作的是冰冻切片，不是石蜡切片，用不着抗原修复，也用不着酶消化。

好好

楼上大师好
我有个笨问题：冰冻切片一定不用做抗原修复和酶消化吗？

zhtp2003

对！

shanghainese

For frozen section IHC staining, you don’t need doing antigen retrieval (e.g. citrate buffer/microwave oven or high pressure cooker-heat) or enzyme digestion for most anti CD3, CD4 or CD8 antibody.  But please use good monoclonal antibody with optimal concentration.  I recommend you use BD Biosciences Pharmingen’s antibody.  If you need order antibody, please contact BD China (Beijing).  After IHC staining, you can do PAS or other staining for your basal membrane.