新手

请教各位老师：
  现在在做肝脏石蜡切片的免疫组化，完全按照操作步骤脱腊，阻断内源过氧化物酶,高压锅修复抗原,加封闭血清,一抗,二抗,三抗,DAB显色，，镜下观察可见着色，苏木素复染，但是再梯度酒精脱水，二甲苯透明后，整张片子就变成了棕褐色，连着几次都是这样，不知为什么，请教同学，说不用二甲苯，可能是二甲苯原因，我觉得没有道理，特请教各位老师。
  另：我作的是胞核表达，加苏木素会影响结果吗？
   谢谢！！！

DINGWEI

你显色后可能就是棕褐色，因没透明，看的不是很清楚，二甲苯透明后，就清楚了。会不会是这样？

临风揽月

封片后再看！

frankbj

可以不衬染。

冰雪

不妨试一试用甲基绿复染。

cambri-tea

当然有影响,你做的是核染色,而苏木精则是染核的,你做的当然没结果了呀!
/你是染什么组织的?目的是什么?
如是胞膜抗体或胞浆抗体则用苏木精衬染细胞核,起到烘托作用,而且可看清细胞形态.
但你是核抗体,你需查查用什么方法好,或试试不做核衬染,用伊红染衬染胞浆,切不可用苏木精,而且伊红不要染太甚!
另,与二甲苯无关!!
BY THE WAY:甲基绿也是染核的,不可用

临风揽月

不对！不论是染核还是染浆都可以用苏木素或甲基绿衬染！！！

cambri-tea

苏木精是衬染胞核的!!!!!而你的一抗是核抗,阳性在核表达,怎么可以还用衬染膜抗体和胞浆抗体的衬染呢?当然不可能好喽.
我的建议,不要用核衬染剂衬染,衬染胞浆为好,试试伊红吧,不过切记不可染深!!!!

cambri-tea

不是吧,你的免役组化阳性是在核内表达,怎么还衬染核呢?衬染了以后你的阳性或衬染的不是就看不清了吗???何况,衬染只是为了更好的看清细胞形态呀,不是吗?
若能用,请阐述理由,谢谢

冰雪

本人赞成"临风揽月"说法,苏木素.甲基绿都可以用来衬染.