淡淡的雨

谢谢老师，再请教一个问题，用高压锅修复抗原是在阻断内源性氧化酶活性前还是在后好些？为什么？阻断的时间多长最佳？

shanghainese

前后均可。

shanghainese

阻断内源性过氧化酶的时间则根据双氧水的浓度和不同的组织器官。一般石蜡切片用3%H2O2-甲醇液10分钟就行了。

淡淡的雨

前辈：：H2O2的浓度是3%还是0.3%啊？？？

黄河

我们这里用的都是3%的
有用30%的H2O2配置的
也有SP试剂盒里有一瓶3%的去离子水的H2O2
两方法都可以
但是我的就是染不出来
郁闷........
正在找原因
另外想问问:
这个阻断用的双氧水一定要用去离子水配的吗????????

shanghainese

有的用3%，有的用0.3%，有的用0.03%，DAKO的阻断内源性过氧化酶液浓度就很低。各实验室所用的浓度不一，但只要能阻断内源性过氧化酶而不损伤组织细胞就行。

淡淡的雨

谢谢shanghainess老师，再请教一个问题，如果用过的H2O2回收，一般可以用多少次，阻断前要复温吗？3%的H2O2对抗原可能有轻微的损害，如用0.3%的H2O2阻断是否要时间长些？

shanghainese

石蜡切片用3%H2O2-甲醇液每周换一次，放在常温下(20度)。
冰冻切片用0.3%H2O2或DAKO阻断内源性过氧化酶液为一次性所用。储存在4度冰箱里。使用前不必复温。10分钟就够了，还没发现对抗原的损害。