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免疫组化异位染色,请教各位老师!

免疫组化异位染色,请教各位老师!

各位老师们好,求教:我做实验用的免疫组化six1(一抗),别人做的是染在细胞核上的,可是我做出来的是染在细胞质,我很苦恼,用EDTA微波修复,EDTA高压修复,都试了全都在细胞质里,确定不是泛染,染色很清晰特异,没有背景,后来又试了柠檬酸高压,胰酶,胃酶,结果是全阴性,我实在没什么办法了,求教可能的原因,或者应该再向哪方面实验,谢谢各位老师!
微波修复是高火5分,中低火10分
高压修复是冒气后3分
一抗过夜孵育,二抗用的迈新的快捷二抗kit-5020 ,DAB显色

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1、一抗试剂说明是否有定位方面的说明
2、别人的方法是否和你的一致
3、免疫组化必须对照同时做,在没有对照的情况下,判断正确与否还是值得商榷
友情提示:别人做的不一定准确,你的不一定就是错误的!

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还是根据说明书来做比较好,不行的话,你把你的一抗给那个人做,试试
为人民服务

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