免疫组化异位染色,请教各位老师!
各位老师们好,求教:我做实验用的免疫组化six1(一抗),别人做的是染在细胞核上的,可是我做出来的是染在细胞质,我很苦恼,用EDTA微波修复,EDTA高压修复,都试了全都在细胞质里,确定不是泛染,染色很清晰特异,没有背景,后来又试了柠檬酸高压,胰酶,胃酶,结果是全阴性,我实在没什么办法了,求教可能的原因,或者应该再向哪方面实验,谢谢各位老师!
微波修复是高火5分,中低火10分
高压修复是冒气后3分
一抗过夜孵育,二抗用的迈新的快捷二抗kit-5020 ,DAB显色