ChenRong

这个和固定的关系比较大点，试着将组织切薄后固定，或是固定液是否对。
还有你试试不要放在60度的水浴箱里来脱水，或是降低到35度来试试。

ChenRong

还可以试试不熬流水冲洗直接脱水
你蜡的熔点是多少？

shanghainese

引用:

原帖由 doctor_wang 于 2012-1-29 21:44 发表
再次感谢您的指点。您是怀疑固定环节出现了问题。
我的固定是超出1:4比例的固定。因为常常仅能获得小鼠肝脏的一半甚或四分之一，所以每个样品均是固定于２０ｍｌ１０％中性福尔马林液中的小杯中的。
组织是一旦获得 ...

也许您拿到组织时已经不新鲜了.

ChenRong

用防脱片做的试试吧，如果做的效果好的话，可以排除固定的问题。
你的片子做的怎么弄出个（透明细胞），你厉害的

doctor_wang

I  always used the adhensive slides, superPlus ,  for preventing tissue drop off the slides. and all the processing is under temperture excluding the paraffing and embeding in the 60 centigrade.
and I wonder if the key factor is in the H&E staining process? Fixation? drying the slice?
I am eager for your advice!

ChenRong

英文看的好累啊，你的意识是你用了防脱片？H&E staining process? Fixation? drying the slice?
你说的这几个都有可能。所以一个个排除，用了防脱片还是这样的话，基本可以说是固定的问题了

doctor_wang

对不起，实验室的电脑没有中文操作系统。我试过室温下进行脱水处理，也试过各种烤片方法。目前看来可能问题出在固定上，因为我们都是使用一个１５ｍｌ的Ｓｉｇｍａ公司的中性福尔马林溶液的小杯子。并没有应用大容器。然后就是将修剪的新鲜肝脏组织（通常是半肝）予以投入杯子，肉眼估计体积比１：７左右。一直浸泡，不换液。直到我们要开始作石蜡块了，通常是半月后。因此，有可能存在像您所说的，固定不充分，部分自溶了。但是我看临床病理科，常常很大的标本，也就装在一个比标本体积大一倍的标本袋中，也就装入等体积甚或更少的固定液在里面，一样在临床上在作ＨＥ及组化。好像病理科也没有提什么意见。所以我现在也不能很肯定是哪方面的问题。

doctor_wang

我的石蜡是sigma公司订的, paraffinPLUS，里面加有些高分子聚合物。熔点是52~58度左右。

doctor_wang

烤片，你们都是６８度烤片吗？那样石蜡一般都很快就融化了是否不好。我都是４０度烤片。我用的是带正电荷的SuperPLUS防脱片的载玻片。

ChenRong

这样，你可以拿到你附近病理科去让他们按照他们的方法做一下。