xiongfei

各位老师，我最近的组织染色出来细胞核总是灰蒙蒙的，不知道是什么原因，请各位老师帮我分析下是不是脱水的问题，我的程序如下：
组织从固定液中取出，流水冲洗30min，放入脱水机过夜，脱水机程序：

1. 50%乙醇 30min
2. 75%乙醇 50min
3. 80%乙醇 1hr
4. 85%乙醇 1hr
5. 95%乙醇 1hr
6. 95%乙醇 1hr
7. 无水乙醇 1hr
8. 无水乙醇 1hr

ChenRong

有图就好了，你的程序也没有太大的问题，你自己想想，最近天气是不是比较潮湿，染色后的脱水是不是不够好

infi

会不会是好长时间没换脱蜡液了，你是北方人吗？会不会是脱蜡液需要加温啊。

xiongfei

老师您好，感谢回复，最近天气是挺潮湿的，不知道这具体有什么影响，希望明示，染色液都是新换的

xiongfei

您好，我是在江南的，室内温度差不多要20几度吧

yuwenlong

应该是脱蜡没有脱好！

ChenRong

引用:

原帖由 xiongfei 于 2013-1-23 08:45 发表
老师您好，感谢回复，最近天气是挺潮湿的，不知道这具体有什么影响，希望明示，染色液都是新换的

天气潮湿会使得在封片时片子被雾化，或是肉眼看不到的，在显微镜下看会一层雾蒙蒙的。
但是你又说是室内20度，应该不太会有湿气，还是要在切片脱蜡开始的问题想想看。

xiongfei

谢谢，我脱蜡液是用的江原的环保脱蜡液，不知道是不是这个原因

ChenRong

对了，固定液也是一个重要的因素

xiongfei

不知道老师常用的固定液配方是什么，我是用的4%多聚甲醛固定的