求助丁老师和其他高手
丁老师：
最近我在做大鼠骨骼肌和心肌结蛋白（DESMIN）的免疫组化，石蜡切片，所用试剂盒是博士德公司的，虽然可以出阳性结果，但非特异性染色非常高，请您能否指点一下，谢谢！
步骤：1，58度石蜡包埋，切片后60度烤片两小时，二甲苯两道个十分钟，100，90，80酒精各五分钟，然后蒸馏水浸泡五分钟，
2，3%双氧水封闭10分钟，PBS洗3次，
3，抗原修复，单纯加热，PBS洗3次，
4，BSA封闭30分钟，然后加一抗过夜，
以下均按照试剂盒要求
以前我一抗浓度为1：100，但现在为1：300，但背景还是高，我周围老师和我说要用超纯水来配制PBS，而且所用瓶子等每次都要高压，而我只是用双蒸水，而且瓶子也是洗净后高压了一次就反复使用了，这样可以吗？
不好意思，我很罗嗦，因为现在我被这染色搞的头很疼！
