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影响抗原

影响抗原

免疫组化哪一步对抗原影响最大?

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影响抗原

引用:
下面引用由古听+叶子2005/10/28 10:34pm 发表的内容:
免疫组化哪一步对抗原影响最大?
能否把您的问题说详细些?

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是这样的:前面一段时间科里的免疫组化总是做的不大理想,有些应该出来的没有出来,结果就是反复做,报告拖了很久.大家都找了很多原因,就是找不出来.后来我们换了中性福尔马林稍微好点了.LCA一般都能出来,L26,CD3,CD79就比较难了.

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影响抗原

不知您用的是那些克隆?
实验时设立了阳性,阴性对照没有?
做不出来的原因有很多。
组织不好,固定不够或固定过头。浸蜡包埋时蜡温过高或时间过长。切片后处理不当。
抗原修复不好,或不该修复的修复了。
一抗失效或浓度太低。一抗孵育不好温度太高或太低。一抗被污染了。
二抗不好。
Streptavidin-HRP 不好。
DAB 失效。
等等。

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你那可能前期处理哪一步温度过高抗原破坏了,如果这个没问题,修复时间加长点,一抗4度过夜,再看看,再不行那你整个系统全换过重来了!!

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引用:
下面引用由古听+叶子2005/10/28 11:36pm 发表的内容:
是这样的:前面一段时间科里的免疫组化总是做的不大理想,有些应该出来的没有出来,结果就是反复做,报告拖了很久.大家都找了很多原因,就是找不出来.后来我们换了中性福尔马林稍微好点了.LCA一般都能出来,L26,CD3,CD ...
浸蜡的温度会不会太高,时间会不会太长?

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请问有没有“修复过度”这种说法?

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引用:
下面引用由古听+叶子2005/11/14 08:44pm 发表的内容:
请问有没有“修复过度”这种说法?
应该有的

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