LDG

各位老师：
                   请教下我做淋巴结的免疫组化，组织的中间老是不表达，只有边缘表达，一知什么原因？谢谢!

liuhuaqing

脱蜡要干净,还要除外非特异性染色(边缘效应)。

shanghainese

引用:

原帖由 LDG 于 2006-7-26 08:39 发表
各位老师：
                   请教下我做淋巴结的免疫组化，组织的中间老是不表达，只有边缘表达，一知什么原因？谢谢!

阴性对照如何?
用的是什么固定剂? 什么一抗?和染色步骤.
最好能把照片传上来.

dingwei

可能是固定不佳

LDG

用的是10%的福尔马林固定，是迈新的一抗，小标本或组织没哪么密的组织就表达得较好，不知是哪种原因

LDG

想请教丁老师，我们科每天标本量大概是150--180左右，下午5点多开脱水机，第二天早上8点结束，麻烦帮我们具体安排一下脱水机固定脱水时间，还有就是哪种试剂多长时间换一下，因为我们老是搞不好，谢谢！

shanghainese

引用:

原帖由 LDG 于 2006-7-28 00:38 发表
用的是10%的福尔马林固定，是迈新的一抗，小标本或组织没哪么密的组织就表达得较好，不知是哪种原因

是由于固定, 脱水, 透明, 浸蜡不够, 中间的细胞没有处理好.

dingwei

说说你的具体时间

LDG

请老师指正，谢谢


福尔马林0.1h
福尔马林3h
80%酒精1h
95%酒精1h
95%酒精1h
95%酒精1h
无水酒精1h
无水酒精0.2h
二甲苯0.2h
二甲苯0.3h
石蜡0.5h
石蜡1h
石蜡1h
石蜡0.25h

dingwei

第一，如果是新鲜组织，3个小时固定短了一点。
第二，如果是大标本，这个脱水时间也短了一点。
福尔马林3-6h
福尔马林3h
80%酒精1.5h
95%酒精1.5h
95%酒精1h
95%酒精1h
无水酒精1.5h
无水酒精1.5h
二甲苯0.2h
二甲苯0.3h
石蜡0.5h
石蜡1h
石蜡1h
石蜡2h

你可以试一下.我说的不一定符合你的要求.