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抗体选择问题？

闲云

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1^# 大中小发表于 2008-4-28 10:57 只看该作者

抗体选择问题？

我最近做一免疫组化方法，但就是没找到用于石蜡切片的抗体，只得买了做细胞和冰冻的抗体，结果在细胞上很好着色（冰冻没条件做），在石蜡切片上再怎么折腾就是没特异性的着色，求求大家，用于冰冻和石蜡的抗体有这么大差异吗？？？为什么呢？？？？

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shanghainese

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2^# 大中小发表于 2008-4-28 11:35 只看该作者

因为石蜡切片上的抗原已经变性了。

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冰雪

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3^# 大中小发表于 2008-4-29 08:29 只看该作者

只知道不能做,不知到为什么不能做,能详细解释一下吗?多谢啦

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shanghainese

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4^# 大中小发表于 2008-4-29 12:00 只看该作者

引用:

原帖由冰雪于 2008-4-29 08:29 发表
只知道不能做,不知到为什么不能做,能详细解释一下吗?多谢啦

很简单。石蜡切片上的组织抗原经过福尔马林固定和制片过程后发生了变性。原来与抗原反应的部位也可能发生了改变，使得一些抗体无法识别抗原了。但是也有一些抗体所识别的抗原部位不因固定和制片过程而发生改变，所以抗体仍然可用在石蜡切片上。

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冰雪

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5^# 大中小发表于 2008-4-29 14:01 只看该作者

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闲云

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6^# 大中小发表于 2008-4-30 11:29 只看该作者

谢谢版主!

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文艺峰

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7^# 大中小发表于 2008-5-9 22:35 只看该作者

那石蜡切片是多数抗原会变性，还是只是少数呀？

从事病理技术工作3年了好像都是混日子过的希望今后能得到大家的帮助一起做好这块工作

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dingwei

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8^# 大中小发表于 2008-5-10 08:22 只看该作者

大多数，所以需要各种抗原修复方法。

本人观点纯属个人偏见，希望大家独立判断，正确引用！

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闲云

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9^# 大中小发表于 2008-5-19 16:53 只看该作者

组织固定变性是指的蛋白的一级结构发生的变化吗？这种能复原吗？
修复应该主要只是让发生交联的蛋白充分暴露，修复液只是在高温时保护抗原吧！？
（不太专业，敬请指正）

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shanghainese

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10^# 大中小发表于 2008-5-22 00:19 只看该作者

引用:

原帖由闲云于 2008-5-19 16:53 发表
组织固定变性是指的蛋白的一级结构发生的变化吗？这种能复原吗？
修复应该主要只是让发生交联的蛋白充分暴露，修复液只是在高温时保护抗原吧！？
（不太专业，敬请指正）

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