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HE染色的问题

HE染色的问题

请教丁老师,我的片子用HE染出后肉眼看感觉很灰,镜下看还可以但不是很理想,很想请教各位指点一二,我的苏木素是改良配置法:  苏木精    2.5克+无水乙醇  100毫升   混匀
                          蒸馏水   600毫升+硫酸铝钾17.5克     混匀
                           以上两种混匀后加0.2克碘酸钠即成

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最后还要加20毫升冰醋酸的   硫酸铝钾改成 硫酸铝

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室温低于25度,要配好后放置二星期以后再用。
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!

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要放置两个礼拜的啊?

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引用:
原帖由 hnzcr 于 2010-4-2 09:06 发表
最后还要加20毫升冰醋酸的   硫酸铝钾改成 硫酸铝
老师们,加冰醋酸的作用是什么呀,我以前也加过,但片子染出来不是很好呀。分化液分化多长时间呢,诊断医师都说我的分化时间短了,我一般苏木素7-8分,分化液15秒左右.

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引用:
原帖由 dingwei 于 2010-4-2 10:56 发表
室温低于25度,要配好后放置二星期以后再用。
室温也不低

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引用:
原帖由 hnzcr 于 2010-4-2 09:06 发表
最后还要加20毫升冰醋酸的   硫酸铝钾改成 硫酸铝
硫酸铝钾和硫酸铝区别大吗?

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1、苏木素加冰醋酸可以使苏木素更具选择性,背景干净,但着色能力会下降,所以室温不同,新旧不同,冰醋酸的量也应该不同。不加冰醋酸很容易核浆共染,对比不鲜明。这可能是你的主要问题。任何一个精典的配方里面任何一种东西都是有作用的,在这里千万别自作聪明或偷工减料,很多所谓的改良都没有精典的好。
2、分化液15秒左右应该是很长了,分化应该看核着色的深度和浆共染的程度,一般我们分化也就1-2秒,如果你要分化15秒,说明你的核染得非常深了,不是染色时间太长,就是苏木素选择性太差。
3、细胞核发灰还要考虑:苏木素染色的片子数是多少,有没有染太多片子,一般500ml染1600至2000张片子。
4、硫酸铝钾和硫酸铝区别在于硫酸铝钾配好后有很多结晶,硫酸铝没有。至于其它区别不明显。
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!

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谢谢丁老师

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冰醋酸

主要作用之一就是用来调节苏木液的PH等电点,如果不放或放少了,PH值高,就会出现丁老师说的核浆共染现象,如果放的太多核又很难着色。

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