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老年斑的特殊染色方法

(一)改良Bielschowsky染色法(Yamamoto & Hirano 1986)用于淀粉蛋白斑(老年斑)和缠结
简述:该方法衍生于Gros-Schulze’s 修改的Bielschowsky方法,并由纽约蒙特弗洛尔医学中心神经病理学实验室Glenna Smith完善,在淀粉蛋白斑和缠结的敏感性之间进行了适当的折中。作为一种淀粉蛋白斑染色方法,用于Alzheimer’s病诊断。
切片:石蜡切片6-8µ。
试剂配制:
(1)20%硝酸银水溶液:硝酸银20g,蒸馏水100ml。
(2)显影液:福尔马林20ml,蒸馏水100ml,浓硝酸1滴,柠檬酸0.5g。
(3)蒸发氨:取200ml 28%氢氧化铵放入烧杯中,烧瓶口不要加盖,在油烟橱内室温下蒸发20分钟。
染色步骤:
(1)石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
(2)20%硝酸银水溶液20分钟。
(3)切片放入蒸馏水同时准备第4步。
(4)把硝酸银一滴一滴加入蒸发氨水中,用力搅拌直到沉淀变清亮为止,再加两滴氨水。切片返回到该液染15分钟,避光。
(5)蒸馏水放入立式染色缸中加3滴蒸发氨水切片浸染在此液中。
(6)加3滴显影液到含有氨-银液染色缸中并搅拌。切片维持在染液中直到包含物是黑色带有黄褐色的背景。显微镜下控制,花费2-5分钟。
(7)蒸馏水洗。
(8)1%硫代硫酸钠5分钟。
(9)蒸馏水洗。
(10)脱水,透明,DPX封固。
结果:缠结黑色,老年斑黑色,背景棕色。

(二)Haga 六次甲基四胺银法(用于老年斑)
简述:这种染色方法能够很好的识别淀粉蛋白斑,同时可以检测一些缠结,而不应该被认为染色对缠结敏感。对诊断 Alzheimer’s 病也作为检测缠结一种染色方法使用。
切片:石蜡切片6µ。
试剂配制:
染色工作液:5%六次甲基四胺500ml,5%四硼酸钠25ml,5%硝酸银25ml。
按照以上顺序混合试剂。
染色步骤:
(1)石蜡切片脱蜡至水。
(2)蒸馏水冲洗。
(3)切片染色工作液中60℃ 3-4小时。
(4)显微镜下观察老年斑和缠结的染**况,直到被染成黑色。
(5)蒸馏水冲洗。
(6)10%福尔马林5分钟。
(7)自来水冲洗。
(8)5%硫代硫酸钠5分钟。
(9)自来水冲洗。
(10)脱水,透明,DPX封固。
结果:淀粉蛋白斑黑色,缠结(罕见)黑色,背景棕**。
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!

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