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求助:酪氨酸羟化酶的免疫组化?

求助:酪氨酸羟化酶的免疫组化?

大家好,最近在做免疫组化遇到了些问题,在网上搜索寻求方法时,正好看到这个论坛,觉得非常好,我想向大家询问一下几个问题:
(1)一抗我用的是兔抗鼠的多克隆抗体,其说明书上写的成分里含有50%的甘油等其他成分,我在使用的时候是不是就按照说明书的稀释比例,直接用PBS(10mM,pH7.2-7.4)的缓冲液稀释即可?
(2)一抗的多克隆抗体经过亲和纯化了下,(说明书中有写,但是没有仔细讲,只有Affinity Purified),那我在做阴性对照的时候,是不是只用正常的没有经过免疫的兔血清代替一抗就可以了?还是这个对照,必须也用经过亲和纯化的正常非免疫兔血清代替一抗?
(3)阴性对照的正常非免疫兔血清是否要和一抗,按照同样的稀释比例稀释?
谢谢大家!

[ 本帖最后由 xysmile 于 2010-10-28 11:24 编辑 ]

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谢谢版主解答

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