组织切片常见问题与对策（转载杂志文章）
此文章转载于2009年2期《临床与实验病理学杂志》
作者：马恒辉,周晓军
我们就组织切片常见的问题与对策进行分析与讨论,旨在与技术人员一起学习和交流,以提高组织切片的质量,为病理诊断提供可靠的依据。
1 切片的问题
不论使用何种包埋介质,切片中出现的许多问题都大致相同。如切片出现不规则、跳片、过厚或过薄等情况,这类问题可以通过适当调节切片刀的角度得到改善。切片出现波纹、划痕、污染以及切片不成形等情况,这类问题则有可能是由于切片刀钝,重新磨刀或更换刀片能够解决此类问题。切片上有垂直细长的划痕或裂痕,多数是由于刀刃上有缺口、标本内有污物或硬物等,可能造成这一人为改变。移动刀座,如果划痕仍然在切片的相同位置出现,就能说明是组织内有污物或硬物,如钙化、砂粒体甚至线头、钢针等,而不是刀刃本身有缺口造成的。切片时组织太软,是由于脱水不足或透明不足,把组织退回到透明液或脱水液,再重新处理,可以有所帮助。但是与正常处理的组织切片相比,可能还是会有所差异。总之,切片时出现的问题很多,下面我们就较常见的几种情况作一介绍。
1. 1 切片蜡带弯曲 切片蜡带弯曲,是由于蜡块的上下两边与刀片的水平线不平行造成的。切片时蜡块要放正,保证底缘与刀片的水平线平行,不能一边高一边低。
1. 2 切片出现空洞。此种情况,不仅影响切片的美观,更主要的是易给病理医生的诊断造成遗漏。如果随着蜡带连续深切,空洞越变越小,说明切片中的空洞是没有切全而造成的人为改变。当切蜡块用的力太大太猛时,组织中的小斑点、小斑块会从蜡块中脱落,在切片上留下一个个的小空洞。这种情况在脱水、透明或浸蜡处理过度的组织中易发生,如肝、脾、肾、脑、淋巴结以及子宫等组织标本,若取材太薄,易造成处理过度,蜡块在粗修和切片时经常会出现空洞。所以,取材时标本的厚度要适中,不能太薄。切片时如果遇到此类蜡块,可将蜡块在冰盘冷却片刻或用湿的棉花沾一下,蜡块接触刀刃用力不能太猛太重,以减少这一人为现象的出现。如果发现蜡带上的组织切片出现空洞,只要蜡块中的组织充足,应尽量再缓慢切片,直到空洞消失。另外,空洞也可能是因为组织在浸蜡时,蜡液中有残留的空气存在所致。这种情况在肺组织标本中尤为多见,即使连续切片空洞也不容易消失。
图3 阑尾组织,包埋时3块组织没有同时埋平,不在同一水平线,切片时造成右下角的一块组织没有切全,形成人为穿孔的假象
图4 蜡块粗修时没有完全修全,组织没有充分暴露****面就急于裱片,切片上形成许多不规则的空洞 图5 组织内含有类似虫卵一类的大量异物,因质地与组织不同,故切片时虫卵从蜡块中蹦出形成空洞 图6 当切蜡块用的力太猛太重时,组织中的小斑点、小斑块从蜡块中脱落,在切片上留下一个个小空洞
1. 3 切片时蜡带不能形成 这一现象的原因可能是因为刀太钝、刀的角度太倾斜、蜡太硬(即使用的石蜡熔点太高)或室温太低。蜡带的形成是依赖于切片时蜡块产生摩擦致热而导致蜡片相互连接。如果刀冷,切片时不足以产热,蜡片就无法相连。
1. 4 切片随着蜡块的运动而运动 这一现象的原因可能是因为室温太高,或蜡太软而产生。如果蜡带不能连续,可以先单张切片,再用镊子或细长的竹签沿蜡块的底端平行牵拉,方可形成蜡带(图7) 。
1. 9 切片蜡带中出现长的刮痕或裂隙 切片上部沿刀刃有小缺口、划痕,大部分是由于刀刃上有蜡屑的积留。前者会造成切片中组织结构的分裂,而后者则会留下轻微的痕迹。刀刃有缺口或蜡块中有硬物,将会产生刀痕(图15) 。如果刀痕在刀移动后仍然停留在切片相同的区域,那么刀痕是蜡块内存有异物(图16、17) 。如果消失了,那么刀痕是刀刃上的缺口造成。金属异物在蜡块中残留最容易损伤刀口,操作时要格外留意。刀背后面有时留有组织碎屑或石蜡残渣,也会使切片出现垂直于刀刃的条纹或痕迹(图18) 。所以,切片时必须保持刀刃的清洁,随时将废屑残渣用毛刷清除干净,
图15 刀刃有缺口,造成切片有裂隙 图16、17 组织内有异物,造成切片有粗细不等的划痕 图18 切片刀上有碎组织废屑或碎蜡屑等异物,造成切片上有轻微的划痕
1. 10 切片漂浮或吸附在切片机上 这可能是因为有静电的缘故,向蜡块上吹热气,或在切片机旁边放盆热水,可以减少静电的产生,避免切片吸附。
（未完待续）
