九日

此文转载《诊断病理学》
J Diag Pathol, June 2007,Vol. 14, No. 3

丽春红2R􀀁亮绿SF 染色法在显示肌纤维和胶原纤维中的应用
作者：田玉旺, 李琳, 李丽, 胡海
在常规病理诊断、鉴别诊断及科研工作中, 显示组织中的肌纤维和胶原纤维多采用VG 染色法。在应用过程中, 我们发现该法所制切片久存易褪色, 细胞核的颜色在染色中也容易被染液脱掉, 从而给临床病理诊断及回顾性研究带来不便。为了准确而清晰地显示肌纤维及胶原纤维, 以利判断病变的性质及发生、发展情况, 我们经大量实验, 采用丽春红2R􀀁亮绿SF 染色法收到了较好的效果。
1 􀀂 材料与方法
1􀀂1 􀀂 标本来源􀀂 常规活检及尸检的心肌组织、血管及小肠组织等。标本用ZenKer 液或Bouin 液固定, 石蜡切片, 厚
5 􀀁m。同时进行VG 染色作为对照, 并观察两种染色方法所染切片保存3 年后有无褪色现象发生。
1􀀂2 􀀂 染液配制􀀂 丽春红2R 磷钨酸乙醇液: 丽春红2R0􀀂5 g, 磷钨酸0􀀂5~ 1 g, 50% 乙醇100 ml。! 亮绿SF 染液: 亮
绿SF 0􀀂3 g, 20%乙醇100 ml。∀ 核复染液: 天青石蓝B 0􀀂1 g,铁矾5 g, 蒸馏水100 ml, 混合后煮沸数分钟, 冷却后过滤, 加丙三醇14 ml, 该液可保存数月。#Mayer 苏木精( 略) 。
1􀀂3 􀀂 染色方法􀀂 切片常规脱蜡至自来水; ! 切片置Bouin液中处理2~ 5 min, 水洗; ∀ 天青石蓝B 复染核3 min, 水洗,
而后用Mayer 苏木精复染5 min, 流水冲洗; #将切片置于丽春红磷钨酸乙醇液中, 室温下5 min; ∃ 切片直接入亮绿SF
染液中5 min; %乙醇脱水, 二甲苯透明, 中性树胶封固。
2 􀀂 结果
肌纤维呈红色, 胶原纤维呈绿色, 细胞核呈蓝黑色( 图
1, 2) 。本法所染切片3 年后不褪色, 而VG 法染色的切片几乎全部褪色。
3 􀀂在病理诊断工作中, 常用的VG 特殊染色法肌纤维着色力较差, 且所染切片不能长期保存。我们经大量实验, 认为
丽春红2R 染料是显示肌纤维的较好染色剂, 切片久存不易褪色。亮绿SF 相对分子质量为792􀀂 86, 为****的阴离子染
料, 能与结构较疏松的胶原纤维牢固结合, 故不易褪色, 具有保持年久的优点。
染色前, 采用Bouin 液对切片进行预处理, 这样可使纤维膨胀, 利于染液的浸透; 同时, 因Bouin 液中含有冰醋酸促
染剂, 可促进染料与组织的结合, 增强染色能力, 所以染色明显加深。丽春红磷钨酸乙醇液染色后不要用水洗, 否则色调
不正。VG 染液中的苦味酸碱性品红对染细胞核的碱性苏木精具有较强的脱色能力, 使核的着色变浅。许多学者都改用
Weigert 铁苏木精, 用氯化铁作媒染剂以加强核着色, 但这种苏木精久存易产生沉淀而失效, 必须临用时配制, 1~ 2 次后
即弃用, 而且配制这种苏木精的乙醇苏木精溶液放置1 周左右才能成熟使用, 染色后, 如果分化欠妥则切片背景灰暗。
我们改用天青石蓝B 并Mayer 苏木精复染细胞核, 染色后稍用盐酸乙醇分化或不分化皆可获得较好的染色结果。配后
的染液可反复使用10 次, 适用于大量标本。因为媒染剂既可用于染色之前混合于染液中, 也可以用
于染色之后。根据这一原理, 我们将磷钨酸媒染剂混合于丽春红染液中, 从而增加了染料与组织的亲和力, 使肌纤维的
着色力明显加强。染色过程中, 我们体会到, 组织标本最好用ZenKer 液或Bouin 液固定。若已用4%甲醛固定的陈旧标
本, 经流水冲洗后再经过ZenKer 液第二次固定或切片经脱蜡水洗后铬化处理, 同样可收到良好的染色效果。该法染色结果鲜艳, 对比明显, 特异性强, 切片不易褪色, 染色时间短, 简便易行, 对疾病的病理诊断及研究具有较好的应用价值。