九日

112 　方法
11211 　冷冻切片　使用日本樱花牌CM241 型恒冷式冷冻切片机, 组织经OCT 组织包埋剂包埋, - 12 ～ - 16 ℃冷冻
2～4min ,切片4～6μm ,丙酮固定后HE 染色。
11212 　快速石蜡切片　使用PHT2400 型病理样品快速超声处理仪(上海震康医疗器材有限公司) ,水浴锅温度为65～
70 ℃,组织(个别组织太小,用擦镜纸包裹) 经10 %福尔马林液20ml 固定2～3min ,去除表面液体;用纯丙酮30ml 脱水2～3 次,3min/ 次(根据组织大小、种类定) ;组织脱水后变白且疏松,浸蜡后将已凝固好的蜡块表面烫熔,包埋组织,待表面稍凝将蜡块平压于玻璃表面,使组织包埋面平整,快速冷冻后切片(3～5μm) ;裱片后用干燥的滤纸将表面水分吸干,酒精
灯烘烤10～15s ,快速HE 染色。由3 位病理医师双盲观察。
2 　结果
冷冻切片、快速石蜡切片都能完成术中快速病理诊断,准确率达99 %。冷冻切片制作程序简单,时间短(15min) ,而
快速石蜡切片,制作时间稍长(20min) 。脑组织快速石蜡切片,由于脑组织结构疏松,组织易处理,切片质量较好,制片
时间可缩短(15min) (图1) 。冷冻切片对温度要求较高,由于脑组织中富含水分,温度太低极易出现冰晶,切片质量和镜
下观察也不如快速石蜡切片(图2) 。但快速石蜡切片如固定
不透,染色过程中易掉片。
3 　讨论
脑组织冷冻切片速度较快,但要求冷冻温度准确,须避免出现冰晶和细胞肿胀,易掉片,因此难度大;快速石蜡切片质量好,易观察,并可做出正确的病理诊断。但操作难点多,不易掌握,传统电炉加热法易使组织收缩卷曲变硬。使用超声波处理仪可有效促进和加速组织的固定、脱水、浸蜡,缩短时间,提高切片质量。在快速制片过程中应注意以下几个方面: ①组织固定不透。组织取材厚度应< 115mm,因脑组织质地疏松,在超声波的作用下能在短时间(2min) 内将组织固定,如组织块较大或质地致密(如脑膜瘤) ,可适当延长固定时间,脱水前应将水分吸干。②组织脱水不好会造成浸蜡不充分,难以切片且质量不好。多数快速送检的脑组织质地较为疏松,可丙酮脱水3min×2 次;脑膜瘤等质地致密体积大者,脱水3min ×3 次,特殊情况下可适当延长。用干燥的纱布(滤纸) 轻轻吸去组织表面多余的丙酮,利于浸蜡。③对脑膜瘤等质地较硬或有钙化的标本,切片时可用1mol/L 盐酸轻轻刷涂组织切面一遍,以软化结缔组织或钙化。另外在捞片时应充分展平,以免掉片。快速石蜡切片技术自开展以来,因方法不易掌握,难以推广,超声波处理仪可设置处理时间和温度,使操作程序化
和规范化,不受冷冻切片机开机准备等因素的影响,可随时使用。而且冷冻切片机价格比较昂贵,而快速石蜡切片成本
低廉,使用方便,尤其适用于基层医院病理科开展快速和慢快速病理诊断。
此文转载于《诊断病理学杂志》,February 2002 ,Vol . 9 ,No. 1
作者：孟　奎 　谢秋红 　马恒辉 　周晓军　石群立