dingwei

中性缓冲福马林固定的目的是为了更好地保存抗原和DNA，对HE切片来说，中性缓冲福马林不是好的固定液，酸性福马林固定后颜色更鲜艳。 如果明白了这个道理，就知道应该用什么固定。如果仅仅是做HE切片（如科研，只要看形态），不需要用中性缓冲福马林固定，而常规病理，就应该用中性缓冲福马林。没有加缓冲液是普通10%福马林，也有人称酸性福马林。

xkj2797xkj

甲醛原液存放过久，会有白色沉淀—副醛生成，这种溶液中有甲酸产生，使溶液变为酸性。酸性甲醛可影响细胞核着色。
所以是不能用酸性甲醛固定组织的！酸性福马林固定后颜色更鲜艳的说法原则上是不对的！

[ 本帖最后由 xkj2797xkj 于 2011-7-27 01:22 编辑 ]

dingwei

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原帖由 xkj2797xkj 于 2011-7-27 01:16 发表
甲醛原液存放过久，会有白色沉淀—副醛生成，这种溶液中有甲酸产生，使溶液变为酸性。酸性甲醛可影响细胞核着色。
所以是不能用酸性甲醛固定组织的！酸性福马林固定后颜色更鲜艳的说法原则上是不对的！

甲醛原液存放过久（一般要1年以上），才会有白色沉淀—副醛生成。而我们说的酸性福马林固定，一般都是配好后就使用，使用时间也不会太长，不存在有甲酸产生，就是有也是微量。当然如果是长时间固定（如需要固定几年的标本）酸性的确不好。福马林固定精典的配方：AF液、AAF液、Helly液等都是酸性福马林液。酸性福马林起作用的不仅仅是pH，主要是加入酸的固定作用（如冰醋酸、重铬酸）。你可以使用中性和酸性二种固定液固定后的组织，切完片染色一下，做一个对照，看看那个鲜艳就清楚了。

xkj2797xkj

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原帖由 鱼的眼泪 于 2011-7-23 23:03 发表
所有的组织都有必要用中性缓冲福马林吗？还是一部分，比如淋巴结之类的才用？

也不一定了，只是说最好用中性缓冲甲醛固定！

dingwei

中性缓冲甲醛固定是针对免疫组化和分子病理说的，并非为了HE切片。现在由于大量的病例都有可能做免疫组化和分子病理，特别是淋巴瘤、乳腺癌、胃癌、软组织等肿瘤，需要这些手段证实或靶向治疗，所以所有都必须使用中性缓冲甲醛固定，因为你事先并不清楚这块组织一定是什么疾病。

刘帮东

我们科使用PBS，蒸馏水，甲醛来配中性固定液，请指教！~

郭建红

我们常规就是中性福尔马林缓冲液，因为一部分组织要做免疫组化和分子病理。

xkj2797xkj

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原帖由 刘帮东 于 2011-12-5 17:16 发表
我们科使用PBS，蒸馏水，甲醛来配中性固定液，请指教！~

浓甲醛10ml，0.01M pH7.4 PBS 90ml这个方法很好！这还是国外推荐的免疫组化通用固定液！