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淋巴结制片:为什么细胞核常常模糊?向各位讨教了(用何种液体固定及应注意的细节

淋巴结制片:为什么细胞核常常模糊?向各位讨教了(用何种液体固定及应注意的细节) (

liu-min6309:
没有看过您的片子很难断定是什么原因。不过我想很可能是固定不好,特别是大块的组织标本。如果是这样,我也想不出办法了。

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淋巴结制片:为什么细胞核常常模糊?向各位讨教了(用何种液体固定及应注意的细节) (

我认为要从几个方面找原因:1、固定。如固定不好,易使细胞自溶有人有时会把配制伏尔马林溶液浓度搞错,应该是每瓶甲醛原液配5000ml伏尔马林溶液。固定时间也不能太短。2、取材及脱水。取材不能取得太厚,太厚脱水容易不充分,脱水冬天的温度不能太低,时间不能太短,最低不能少于小时/道,酒精要注意更换,别太久不换影响质量。3、脱蜡洗蜡。两道二甲苯时间不要低于2分钟/道,后面的两道无水乙醇时间也不能短,且要注意每缸试剂都要满过玻璃片。4、染色。时间要足够长,特别是素木素氧化不太好的时间要更长,必要时可试用加热。5、分化。时间不能太短,太短胞核与胞浆易模糊。6、蓝化(反蓝)。时间要足够长,最好是放在自来水中自然蓝化。7、透明和封片也是很重要的哦!

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:em03:

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酒精已固定送检标本,可用福尔马林重新固定一下或给医院的医生送福尔马林固定液。 :em02:

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不知道您用的是何种固定液固定?
在这里给您推荐用Bouin固定液,此液固定效果好,组织细胞结构完整,细胞核着色鲜明.
配方:饱和苦味酸水溶液:甲醛水溶液:冰醋酸=15:5:1.
如果要求固定的时间短,也可以在上液中加入80的酒精(占容积总量的60%左右)配成混合液.

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一般淋巴细胞苏木素染色时间较短,固定不佳,脱蜡,分化可能存在问题。

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1、这种情况在夏季很常见,而且多见于一些小门诊手术标本直径在0.5-1cm之间,(非胃镜及子宫刮诊)我曾经认真的追究过原因,发现大多数情况是因为临床医师没有立即固定的意识。他们往往是在手术完成,缝好皮肤打好敷料以后才会送检。而小医院医生手术不熟练,有的门诊手术经常会做一到一个半小时,然后再加上缝皮,包扎的时间,有的医生还要手术做完后跟病人讲解做临床外检的必要性,开处置单,再等待病人交费后固定送检!!这样一来,在室内温度在28—30度(有空调的情况下)经过两个多小时后离体组织才得到固定。如果再加上组织含血丰富或者富含水分,固定液配置后甲醛的挥发(一般小医院手术室都是隔几天才配一次,门诊手术时间就拖得更长),浓度不够,使得有些细胞就产生毛玻璃样改变。

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我曾遇到过这种状况,最后更换脱水剂,效果不错,另我现在用95%酒精及丙酮脱水脱脂,效果不错,制片中经常更换试剂是很重要的,另我们脱蜡一般采取在切片二甲苯中浸30分钟的方法,建议试用。个人体会,不一定正确,欢迎指教。

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本人试100%甲醇固定30 微米的淋巴结冰冻切片,染色效果比酒精,福尔马林固定要好。
还可以用ZENKER(一种含汞的固定试剂),对淋巴结,脾等网状内皮组织固定效果好。

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我个人同意楼上的意见啊。

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