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血性体液标本涂片制作方法探讨(转)

血性体液标本涂片制作方法探讨(转)

血性体液标本涂片制作方法探讨
韩磊,贾惠英,谢秋红
关键词:体液;细胞学;红细胞
中图分类号:R 361十.3文献标识码:B
文章编号:1001一7399(2010)06一0765一O1
   

      在临床病理细胞学诊断工作中,临床送检的血性体液标本(如血性胸水、腹水、血尿等)涂片作HE染色后,镜下可见较多的红细胞,背景深染成红色,影响结果的观察,如何既去除红细胞,又保持其它细胞形态的完整性,以利于HE或免疫组化标记后的鉴别诊断,很有必要。本文对3种不同处理的血性体液标本进行了比较,现报道如下。
1材料与方法
1. 1材料
江苏省连云港市第二人民医院临床送检的新鲜血性体液标本,每次量>200 ml。
1.2方法
用吸管吸取标本底部液体15  ml人离心管,2000 r/min,离心10  min,倒掉上清液,取沉渣均匀地涂片3张,待半干时入95%乙醇固定10 min,自来水洗1 min x 2次,之后将涂片分3组处理。A组:直接HE染色;;B组:人10%冰醋酸10 min,并轻微摇动,自来水充分洗涤,HE染色;C组:人10%盐酸10 min,并轻微摇动,自来水充分洗涤,HE染色。光镜下观察3组涂片。
              .

图1   A组:细胞形态完整不变形,核染色好,红细胞较多,背景较红
图2   B组:10%冰醋酸处理后,细胞胞质膨胀,核染色好,红细胞消失约一半,背景浅红
图3   C组:10%盐酸处理后,红细胞几乎消失或淡染,其它各细胞完整不变形,细胞结构清晰,着色鲜艳,背景清晰

2结果
    3种不同方法处理的涂片,经镜下阅片比较,A组经HE染色处理后显示:细胞形态完整不变形,核染色好,红细胞较多,背景较红(图1);B组经10%冰醋酸处理后显示:细胞胞质膨胀,核染色好,红细胞消失约一半,背景浅红(图2);C组经10%盐酸处理后显示:红细胞几乎消失或淡染,其它各细胞完整不变形,细胞结构清晰,着色鲜艳,背景清晰(图3)。

3讨论
      A组是作者日常工作中,常用的制片染色方法,虽然能够保持细胞形态的完整性,染色结果也比较满意,但是对于血性体液标本,就暴露出这种方法的不足,不能消除红细胞,背景较红,影响结果的观察,给查找癌细胞造成了一定的困难。本实验试图用B组中10%冰醋酸弱酸的特性来消除红细胞,但冰醋酸能使细胞膨胀,仅能消除部分红细胞,背景浅红,仍不能达到满意的效果。在C组中,10%的盐酸处理涂片,可使大部分红细胞迅速裂解,并在洗涤中脱落,使涂片中红细胞几乎完全消失,背景干净,而癌细胞和其它细胞形态完整、不变形,染色结果也鲜艳、清晰,有利于镜下观察,大大提高阳性检出率。同时由于盐酸裂解红细胞的同时既能洗去涂片中的蛋白质成[1],防止蛋白质聚集在细胞周围而阻止免疫组化试剂进人细胞,又能充分暴露细胞内抗原,这样在做免疫组化标记时既减少了非特异性着色,降低了背景,又增加了特异性和敏感性,提高了阳性率[2]。由此可见,10%盐酸处理血性体液标本的方法成本低,操作简单,效果满意,值得推广。


参考文献:
收稿日期:2010 - 04 - 02
作者单位:江苏省连云港市第二人民医院(西院)病理科,连云港
            222023
作者简介:韩磊,男.主管技师。E-mail;hangeda@ 163. com
[1]颜亚辉,郑辉,张革进.血性胸腹水涂片中红细胞的去除方
      法LJ].临床与实验病理学杂志,2004,20(6);750.
[2」熊正文,胡海霞,李春光,等.盐酸水解暴露抗原促进组织化学
      反应的研究仁J].中国组织化学与细胞化学杂志,1996,5(1);
        71
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