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冰冻切片的注意事项:

冰冻切片的注意事项:

冰冻切片的注意事项:
(1) 速冻:是冰冻切片的关键,因为只有速冻才能减少组织内的冰晶,最好的办法是将速冻头压在组织上,冻好后就可切片。特别适用于较脆的组织。而含有脂肪较多的组织,最放放在液氮里处理。在液氮里冷冻要注意不要冻过头,2~3秒钟就要拿出来看一下,只要有4/5的组织已经冻住就可以了,待冷冻头拿出后刚好全部冻住,否则就会引起组织发脆,或冷冻头与组织分离。
(2)固定:切片后应立即放入甲醇中固定,不能等切片干后再固定,后者容易造成细胞退变。固定液有很多种,根据我们的实践,认为甲醇作用快,收缩小,染色较清晰,是冰冻切片最理想的固定液。
(3)包埋剂:可用普通胶水代替,但要加入适量的水(胶水与水的比例大约在2:1左右)。太稀了,容易损伤切片刀;太稠了,粘在切片上不容易洗掉,影响切片的质量。
(4)冰冻用切片刀不仅要磨的快,而且要磨的直,否则切出的片子就不会平整,不能进入抗卷板。最好能使用一次性刀片。
(5)如组织发脆,可等几分钟后再切,也可用手在组织上稍稍加温;如果用手去摸组织块,最好戴手套,或用玻片间的纸夹在手与组织之间,以防感染。
(6)冷冻室的温度冬天一般设在-19℃左右,夏天设在-22℃左右。不同的组织,有不同的温度要求:肝脏、甲状腺组织温度控制在-15℃左右,脂肪组织一般在-35℃以下。
(7) 冷冻切片机应长期处于恒温冷冻状态,经常的开关机器电源容易造成压缩机损伤。

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