请教各位老师，ki-67始终做不出来。
步骤如下：确诊乳腺癌蜡块切片2um，65摄氏度烤片4小时，二甲苯、无水乙醇、95%乙醇、75%乙醇各两缸5分钟，自来水冲洗，PBS 2min*3,3%过氧化氢去离子水25摄氏度5分钟，胃蛋白酶消化液37摄氏度8分钟，EDTA高压热修复140摄氏度3分钟（阀门窜气后计时），高压锅放入冷水中冷却，阀门降下后，拿出EDTA塑料盒，放入冷水冷却，一抗4摄氏度过夜（一般16小时左右），二抗37摄氏度30分钟，DAB显色，各步骤之间均PBS 2min*3。
用上述方法做其他抗体均正常，唯独ki-67始终阴性，试过一抗25摄氏度过夜、二抗37摄氏度30分钟也不见阳性。产品为中杉金桥公司，克隆号：K-2 。
请问各位老师问题应该出在哪里。
