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求助!!!希望老师们给我帮助,愁死了

跪求···

老师们:这两年来制片一直有问题,比如说:小活检组织有裂隙,我观察了一下组织外围最明显,组织中央就还好,我们一直在找原因,曾经以为是用了17年的老式切片机有问题,现在更换了莱卡2245新机器后也没有得到改善,所以开始从脱水机中找原因。
我从浸蜡开始找原因,我设定的温度在65,用温度计一测70多度,吓一跳,对于国产的东西不放心,继续去包埋机中测量,一看吓一跳70度呀,又是温控不准。(70度的浸蜡对组织影响大吗?会照成组织的裂隙吗?)我现在在做试验,将温度下调:比如脱水机调整到60度,测量后在65度左右。
我们的脱水流程是:
1.中性甲醛2小时
2.中性甲醛1小时40分钟
3.60%乙醇40分钟
4.95%乙醇1小时
5.95%乙醇1小时
6.100%乙醇1小时30分钟
7.100%乙醇1小时30分钟
8.二甲苯1小时30分钟
9.二甲苯1小时45分钟
10.石蜡45分钟
11.石蜡45分钟
12.1小时。
我们一个星期110-250个蜡块之间,一个星期换一处脱水机液体:如二甲苯一瓶、无水乙醇一瓶、中性甲醛500ml,所有液体往前移动,我自认为我的液体已经换得够勤密了,但是出来的片子依旧不理想。
各位亲们、老师们帮我指点下迷津,有什么地方要改进的呢。

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好像找到原因了

我们的胃镜小活检的标本出现明显裂隙,我跟医生研究了一下应该是固定液溶度过高,固定时间过久而产生的。
这两天做实验,用胆囊黏膜更换脱水步骤及脱水液,均无明显的裂隙,只有极少数的裂隙。但是胃的活检裂隙超明显,想起来胃活检的固定液是消化内科配制的,而且有个标本在固定液停留了三四天裂隙就蛮明显的、完全无法看。于是我明白了,他们浓度没有掌握好,甚至是原液······我这样的推断对吗?
固定液浓度过高,时间过长使标本出现裂隙?

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回复 63# 的帖子

你试试小组织包埋后将冰冻时间减少、冰冻温度降低一些,我试了确实有改善。

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