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求助!!!希望老师们给我帮助,愁死了

求助!!!希望老师们给我帮助,愁死了

最近切片老是有问题,大小标本都不能连续切片,就是每张切片老是中断,不知道怎么回事,还有就是切片的组织,老是碎,感觉就像切甲状腺的胶质一样,很碎,胃镜小标本也是这样,求助老师!!
下面是我用的脱水程序:
石蜡熔点58-60°,固定时间足够长,基本上都超过24小时。刀片是莱卡的新刀片。
我们的脱水机是12缸无压力的那种。石蜡温度64°
1.福尔马林固定液2小时(提前固定一天多)
2.75%酒精 2小时
3.85%酒精  2小时
4.95%酒精  2小时
5. 95%酒精 2小时
6.无水酒精 1小时
7.无水酒精 1小时
8二甲苯  0.5小时
9.二甲苯  0.5小时
10.石蜡  0.5小时
11石蜡  1小时
12.石蜡 1.5小时

95的酒精用桶装的那种,经过测量只有90°。在就是因为气味大,开的窗,室内温度估计在零下1-3度


请老师给点意见建议,不胜感激!!

[ 本帖最后由 wxhwxh 于 2012-11-23 10:33 编辑 ]

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回复 23# 的帖子

蜡的熔点是58-60度,蜡缸的温度58度,能融化彻底吗?毕竟我们的室内温度有点低,二甲苯石蜡都是刚换上不久的

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这次讨论确实学到了不少东西,尊重前辈是必须的,但是学习新技术也是刻不容缓的。有了问题能解决非常高兴,关于切面组织碎末状,跟组织包埋时保温盒的温度有没有关系?请教老师,我每次包埋完,取下蜡盒后,那个钢化磨具就沾满了蜡,下次用的时候我就放在64度的保温盒中,使钢化磨具的蜡融化,这样钢化磨具的底面温度也很高,在放入淋巴结等组织,是不是碎末跟这个也有点关系???

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组织发脆原因是组织内蜡没有充分浸进去

这一步怎么解决呢?
还有个问题,我染色的的时候,核老是有点发红,怎么回事呢

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我忘了在书上还是在网站上看到过,低浓度酒精脱组织中的水,高浓度的酒精脱低浓度酒精的水

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对了,还有个问题请教老师们,配固定液跟当地的自来水酸碱度有关系吗???

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回复 46# 的帖子

谢谢这位丁老师,第二天试过了,效果确实不错,过了几天在切片,又出现问题了,郁闷,我在调整一下酒精的浓度在试试。今天切得片子,很困难,切阑尾的时候,刀片蹦蹦的响,就跟切子宫肌瘤似的,有时候一下蹦下一小块组织,这是什么情况???

[ 本帖最后由 wxhwxh 于 2012-12-6 13:58 编辑 ]

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回复 49# 的帖子

不是说现在不太赞成水洗了吗?好多人都不水洗,我12缸都用上了

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回复 60# 的帖子

能吗?我们胃镜室的固定液都是我们配置的,按照10%的浓度。好像是固定时间长了,裂隙多。但是没试过固定时间短点好不好用。改天我试试

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感谢各位老师的大力帮助。现在好多了

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