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病理技术之33问-------Harris苏木素怎么配制?

病理技术之33问-------Harris苏木素怎么配制?

虽说当下可以购买苏木素染色,但是知道苏木素是怎么配制出来的,对病理技术工作者来说很有必要。

1,称取苏木素2.5克溶解在25ml无水乙醇里。
2,另一烧杯中50克钾明矾溶解在500ml蒸馏水中,加热溶解。
3,以上两液加热混合。
4,加氧化汞1.25克,混匀。
5,溶液凉后加冰醋酸20ml.

过滤后就是Harris苏木素染液了。

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对不起,更正一下,应该是叫铝明矾,因为硫酸铝钾在这里的有效成份是铝而不是钾,铝明矾与苏木素的最佳比例比例应该是8~10:1。如果是否20:1配制后会形成凝胶样物,在效成份很少,染色力也很差。不信可以试试。

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硫酸铝钾应该叫钾明矾或白矾。这是个名称,和有效成份没有关系。
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!

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引用:
原帖由 九日 于 2012-11-30 23:16 发表
虽说当下可以购买苏木素染色,但是知道苏木素是怎么配制出来的,对病理技术工作者来说很有必要。

1,称取苏木素2.5克溶解在25ml无水乙醇里。
2,另一烧杯中50克钾明矾溶解在500ml蒸馏水中,加热溶解。
3,以上两 ...
氧化汞有两种,不知你用哪一种?

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谢谢丁老师!硫酸铝钾确实应该叫钾明矾或白矾。受益,赞!

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我是铝与苏木素的比例为20:1,我们的苏木素配好后仅用1周就不能用了,不管染多少片,就用1周,颜色由紫红到桔红色,不能用废弃,请问各位大侠何原因?我自己分析估计是自来水偏酸,带进染液的H离子越来越多,所以颜色变红了.

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引用:
原帖由 梅花 于 2012-12-29 20:52 发表
我是铝与苏木素的比例为20:1,我们的苏木素配好后仅用1周就不能用了,不管染多少片,就用1周,颜色由紫红到桔红色,不能用废弃,请问各位大侠何原因?我自己分析估计是自来水偏酸,带进染液的H离子越来越多,所以颜色变红了.
如果是配制Harris苏木素,硫酸铝钾与苏木素的比例一定不要超过10:1。
先用蒸馏水加热溶解硫酸铝钾,用无水乙醇溶解苏木素,把溶解的苏木素倒入已溶解的硫酸铝钾蒸馏水中,煮沸1~2分钟(不可过久!),慢慢加入红色氧化汞(苏木素与氧化汞比例2:1),继续加热和搅拌溶液至深紫色。随即(立即!)用冰水冷却,恢复至室温后过滤备用,使用前过滤后每100ml加冰醋酸4~5ml。
我们一直是这么配制,使用1~2个月都很稳定。你注意一下配制细节,应该能改善。

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感谢楼上老师。我几年来都是这样配的,方法与你一样,只是铝与苏木素的比例不一样,以前可以用一个月,而且使用过程中表面的氧化膜越来越多,分化后水冲5分钟可以蓝化,现在的要用氨水返蓝,否则细胞核无法蓝化,氧化膜也少,到最后变为桔红色,稀的。我问总务科说水源是有变的,用PH纸测是偏酸,苏木素变红,无法蓝化如何解释?

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再次请教一下,为什么铝与苏木素为10:1,很多技术书上Harris配方都是20:1,是不是改良了?   

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硫酸铝钾作为媒染剂,主要是苏木红与二价铝盐结合,形成铝-苏木红蓝色色淀,与细胞核结合。如果所用硫酸铝钾量较多时,已经将近饱和,当温度降低和时间一长,就有结晶析出,所以,在配制苏木素时候硫酸铝钾量加多没有意义,实际还可将硫酸铝钾量稍减少。
(本观点纯属本人意见!仅供参考!)

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