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求助组化抗原修复之后的疑问

修复完之后修复液与PBS不会有交叉反应,问题出在修复完了没有冷却:可采用自然冷却,也可以直接用自来水冲凉。如果片子是热的,在拿出来的过程中片子快速干燥,抗原瞬间破坏,造成切片部份或全部阴性。
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!

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自然冷却与快速冷却我做了做多实验对照,我自己的结论并不是那么回事:
自然冷却,在相同修复时间下结果比自然冷却强,因为从120度到室温(60℃的片子拿出来只要放得慢一点,也容易干燥,也会不着色)需要一定的时间,说白了就是切片在自然冷却过程中还在高温下修复。
快速冷却,立即中止反应,并没有出现影响抗原的现象,如果增加一点修复时间,然后快速冷却,同样也能达到与自然冷却相同的效果。
而且抗原修复很难用充分的概念,只是相对而言:少了会不足,增加一抗浓度会达到好的结果,同样,过一点,可降低一抗浓度,当然这也要一定的度。所以稳定的抗原修复方法最重要。就象你说的“自来水的温度,体积,与高压锅的接触面积,这些因素对吸热过程都是有很大影响”,其实你没考虑到自然冷却与室温、体积、高压锅的大小有很大的关系,而且经历时间长,变量大,影响也更大。而用自来水冲,作用时间短,变化小,影响因素就小。
对于抗原修复的理论到现在为止都是猜测,石善溶也只是从一个误操作中发现了其中的变化,并不知道其真正的原因,而且高温修复早就违背了蛋白质变性的理论,因此,也不能简单用蛋白质变性的理论去解释。DNA在解链后快速冷却可以阻止双链的复合,难道就不能出现某些抗原决定簇在打开后也有回复的可能?一切都是浮云,一切都有可能。
所以,我们只能用实验来证明其种现象,找出怎样做出稳定结果的规律。然后,经过大量的实验,才可能找出抗原修复的真正原理。
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“不管白猫黑猫,捉住老鼠就是好猫”, 这是我一生最反感的一句话,十几年来,我们很多的国人就因为这句话,没有了道德,没有理想,没有了良心,为达目的不择手段。当然老邓的初衷并非这样。
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