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细胞凋亡基因蛋白bax,bcl-2等按试剂盒说明操作,但非特异反应太多,寻求帮助!!!  

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是免疫组化.

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是小鼠子宫组织.波恩液固定,时间不定:24h-5天.
1、切片脱蜡至水
2、0.3%过氧化氢甲醇溶液阻断内源性过氧化物酶.37℃,20分钟.pH7.2 PBS洗三次,每次5分钟。
3、滴加super blocking,37℃,15分钟.
4、放入ph6.0柠檬酸盐抗原修复液内电炉隔水加热,抗原修复液温度到92℃时开始计时,20分钟,室温自然冷却.
5、滴加mouse-to-mouse blocking.37℃,15分钟。PBS洗3次,每次5分钟。
6、滴加非免疫正常血清37 ℃,15分钟。
7、甩去多余血清,加一抗(兔抗鼠)4℃过夜。PBS洗3次,每次5分钟。
8、滴加生物素化二抗(羊抗兔和鼠),37 ℃,30分钟。pBS洗3次,每次5分钟。
9、滴加HRP37 ℃,15分钟。PBS洗3次,每次5分钟。
10、棕色DAB显色1~5分钟。冲洗干净。
11、苏木素复染。约1分钟。冲洗干净。
12、脱水,透明,中性树胶封固。
有问题吗??

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谢谢。
我用的是电炉隔水加热,能快速冷却吗?我用的是室温自然冷却。

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我试试吧.谢谢!

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