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细胞凋亡

细胞凋亡

刘老师:不知你是做石蜡还是冰冻切片?若是过氧化物酶标记,我认为减少非凋亡细胞的强染色应从几个方面考虑:
1.做石蜡切片固定剂,应4%多聚甲醛溶液(溶于pH7.4PBS中)固定,固定后应24小时流水冲洗,最好低温蜡包埋
2.阻断溶液:0.3%H2O2甲醇溶液
3.蛋白酶K消化时间不应太长
4.转化剂-POD应用100mM Tris-HCI,150Mm NaCl pH7.5以1:2—1:5稀释。
5.增加冲洗次数
6.DAB最好自己配置,最终浓度0.025%,显色时间可延长。
以上只是本人小建议,不知对你是否有帮助。

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