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[讨论]请教:如何作出好的细胞学的免疫组化...

[讨论]请教:如何作出好的细胞学的免疫组化...

不知您说的是脱离细胞还是培养细胞?我作过培养细胞,只要将细胞长在或粘在栽玻片上就行了。然后固定,染色与免疫组化一样。

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[讨论]请教:如何作出好的细胞学的免疫组化...

对不起,没作过。我想固定应与抗体有关,有的可用福尔马林,有的只可用丙酮。

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[讨论]请教:如何作出好的细胞学的免疫组化...

血多的液体是很难做,我没有作过,但是红细胞会产生非特异性染色。丁先生不妨用分离或溶解红细胞的方法去除红细胞。比如搞免疫的人在外周血里加溶解液溶解掉红细胞,然后离心分离出白细胞。我想您可以试试用在脱落细胞学上。不过成本要增加一些。

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[讨论]请教:如何作出好的细胞学的免疫组化...

用没用过Ficoll-Hypaque 分离液?没用过可以试试。
1   复温Ficoll-Hypaque 22-25°C。
2   加 5 mls Ficoll-Hypaque 入15 ml 圆锥型离心管内。
3   慢慢地加 10 mls 标本到 5 mls Ficoll-Hypaque 上层(面),别让两层液体相混了。
4   离心 1600-1800 转/分 (500xg) 室温 15-20 分钟.
NOTE:Raise the centrifuge speed slowly and gradually, about 3 minutes, from 0 to 1600 rpm (500xg).  Be sure the break is off.
5   Carefully remove top layer, discard and transfer the cells at the interface of the solutions into a clean 50 ml conical tube.

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